◎ பல்துறை, நம்பகமான தேவைக்கேற்ப திரவ கையாளுதலுக்கான மைக்ரோ ஸ்விட்ச்கள்

www.chinacdoe.com ஐப் பார்வையிட்டதற்கு நன்றி.நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவி பதிப்பில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது.சிறந்த அனுபவத்திற்கு, புதுப்பிக்கப்பட்ட உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு பரிந்துரைக்கிறோம் (அல்லது Internet Explorer இல் இணக்கத்தன்மை பயன்முறையை முடக்கவும்).இதற்கிடையில், தொடர்ந்து ஆதரவை உறுதிப்படுத்த, தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் வழங்குவோம்.

ஆன்-சைட் திறன்களைக் கொண்ட லேப்-ஆன்-எ-சிப் அமைப்புகள் விரைவான மற்றும் துல்லியமான நோயறிதலுக்கான சாத்தியத்தை வழங்குகின்றன மற்றும் உயிரியல் மருத்துவ உபகரணங்கள் மற்றும் பயிற்சி பெற்ற வல்லுநர்கள் கிடைக்காத வள-கட்டுப்படுத்தப்பட்ட அமைப்புகளில் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.இருப்பினும், மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் டிஸ்பென்சிங், ஆன்-டிமாண்ட் வெளியீடு, நம்பகமான செயல்திறன் மற்றும் ரியாஜெண்டுகளின் நீண்ட கால சேமிப்பு ஆகியவற்றிற்கு தேவையான அனைத்து அம்சங்களையும் ஒரே நேரத்தில் கொண்டிருக்கும் பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் சோதனை முறையை உருவாக்குவது ஒரு பெரிய சவாலாக உள்ளது.எந்த திசையிலும் திரவங்களைக் கையாளவும், பயன்படுத்தப்பட்ட காற்றழுத்தத்திற்கு துல்லியமான மற்றும் விகிதாசார பதிலை வழங்கவும் மற்றும் திடீர் அசைவுகள் மற்றும் அதிர்வுகளுக்கு எதிராக நிலையானதாக இருக்கும் ஒரு நெம்புகோல்-செயல்படுத்தப்பட்ட மைக்ரோ டிராவல் சுவிட்ச் தொழில்நுட்பத்தை இங்கு விவரிக்கிறோம்.தொழில்நுட்பத்தின் அடிப்படையில், 18 நோயாளிகளிடமிருந்து அனைத்து மருத்துவ நாசி மாதிரிகளின் "மாதிரி-இன்-பதில்-வெளியீட்டு" செயல்திறனை நிறைவேற்றும் வினைப்பொருள் அறிமுகம், கலவை மற்றும் எதிர்வினை செயல்பாடுகள் அனைத்தையும் ஒருங்கிணைக்கும் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை அமைப்பின் வளர்ச்சியையும் நாங்கள் விவரிக்கிறோம். இன்ஃப்ளூயன்ஸா மற்றும் 18 தனிப்பட்ட கட்டுப்பாடுகள், நிலையான பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஃப்ளோரசன்ஸ் தீவிரத்தின் நல்ல ஒத்திசைவில்.தொழில்நுட்பத்தின் அடிப்படையில், 18 நோயாளிகளின் அனைத்து மருத்துவ நாசி மாதிரிகளின் "மாதிரி-இன்-ஆன்சர்-அவுட்" செயல்திறனை நிறைவேற்றும் வினைப்பொருள் அறிமுகம், கலவை மற்றும் எதிர்வினை செயல்பாடுகள் அனைத்தையும் ஒருங்கிணைக்கும் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை அமைப்பின் வளர்ச்சியையும் நாங்கள் விவரிக்கிறோம். இன்ஃப்ளூயன்ஸா மற்றும் 18 தனிப்பட்ட கட்டுப்பாடுகள், நிலையான பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஃப்ளோரசன்ஸ் தீவிரத்தின் நல்ல ஒத்திசைவில்.Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп மற்றும் 18 ஒட்டெல்லிக் கான்ட்ரோலி цией (கோஃபிஃபிட் பிர்சோனா> 0,9).இந்தத் தொழில்நுட்பத்தின் அடிப்படையில், 18 இன்ஃப்ளூயன்ஸா நோயாளிகளிடமிருந்து அனைத்து மருத்துவ நாசி மாதிரிகளுக்கும் மாதிரி-இன்-ரெஸ்பான்ஸ்-அவுட்-ஐ செயல்படுத்தி, ஒரே செயல்பாட்டில் ஊசி, கலவை மற்றும் எதிர்வினை செயல்பாடுகளை ஒருங்கிணைக்கும் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை அமைப்பின் வளர்ச்சியையும் நாங்கள் விவரிக்கிறோம்.மற்றும் 18 தனிப்பட்ட கட்டுப்பாடுகள், நிலையான பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை ஒளிரும் தீவிரம் (பியர்சனின் குணகங்கள் > 0.9) உடன் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளது.இந்தத் தொழில்நுட்பத்தின் அடிப்படையில், 18 மாதிரி நாசி நோயாளி மாதிரிகள். இன்ஃப்ளூயன்ஸா மற்றும் 18 தனிப்பட்ட கட்டுப்பாடுகள், ஃப்ளோரசன் தீவிரம் பொருந்திய அனைத்து மருத்துவ நாசி மாதிரிகளையும் பகுப்பாய்வு செய்ய, ரியாஜென்ட் ஊசி, கலவை மற்றும் எதிர்வினை செயல்பாடுகளை ஒருங்கிணைக்கும் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை அமைப்பின் வளர்ச்சியையும் நாங்கள் விவரிக்கிறோம். நிலையான பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினையுடன் (பியர்சனின் குணகம் > 0.9).முன்மொழியப்பட்ட இயங்குதளமானது உயிரியல் மருத்துவப் பகுப்பாய்வின் நம்பகமான தன்னியக்கத்திற்கு உத்தரவாதம் அளிக்கிறது, இதனால் பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் சோதனை சாதனங்களின் வணிகமயமாக்கலை துரிதப்படுத்த முடியும்.
மில்லியன் கணக்கான மக்களின் உயிரைப் பறித்த 2020 கோவிட்-19 தொற்றுநோய் போன்ற வளர்ந்து வரும் மனித நோய்கள், உலகளாவிய ஆரோக்கியத்திற்கும் மனித நாகரிகத்திற்கும் கடுமையான அச்சுறுத்தலை ஏற்படுத்துகின்றன1.நோய்களின் ஆரம்ப, விரைவான மற்றும் துல்லியமான கண்டறிதல் வைரஸின் பரவலைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கும் சிகிச்சை விளைவுகளை மேம்படுத்துவதற்கும் முக்கியமானதாகும்.மையப்படுத்தப்பட்ட ஆய்வகங்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட ஒரு முக்கிய கண்டறியும் சுற்றுச்சூழல் அமைப்பு, அங்கு சோதனை மாதிரிகள் மருத்துவமனைகள் அல்லது கண்டறியும் கிளினிக்குகளுக்கு அனுப்பப்பட்டு, நிபுணர்களால் நடத்தப்படும், தற்போது உலகளவில் கிட்டத்தட்ட 5.8 பில்லியன் மக்களுக்கான அணுகலைக் கட்டுப்படுத்துகிறது, குறிப்பாக வள-கட்டுப்படுத்தப்பட்ட அமைப்புகளில் வசிப்பவர்கள்.விலையுயர்ந்த பயோமெடிக்கல் உபகரணங்கள் மற்றும் தகுதி வாய்ந்த நிபுணர்களின் பற்றாக்குறை உள்ளது.மருத்துவ நிபுணர்கள் 2. எனவே, தகவல் கண்டறியும் முடிவுகளை எடுக்க மருத்துவர்களுக்கு சரியான நேரத்தில் நோயறிதல் தகவலை வழங்கக்கூடிய பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் டெஸ்டிங் (POCT) திறன் கொண்ட மலிவான மற்றும் பயனருக்கு ஏற்ற லேப்-ஆன்-எ-சிப் அமைப்பை உருவாக்க வேண்டிய அவசரத் தேவை உள்ளது. .மற்றும் சிகிச்சை 3.
உலக சுகாதார அமைப்பின் (WHO) வழிகாட்டுதல்கள், ஒரு சிறந்த POCT மலிவு, பயனர் நட்பு (குறைந்த பயிற்சியுடன் பயன்படுத்த எளிதானது), துல்லியமான (தவறான எதிர்மறைகள் அல்லது தவறான நேர்மறைகளைத் தவிர்க்கவும்), வேகமாகவும் நம்பகமானதாகவும் இருக்க வேண்டும் (நல்ல மறுநிகழ்வு பண்புகளை வழங்குதல்) மற்றும் டெலிவரி செய்யக்கூடியது (நீண்ட கால சேமிப்பு மற்றும் இறுதிப் பயனர்களுக்கு எளிதாகக் கிடைக்கும்)4.இந்தத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய, POCT அமைப்புகள் பின்வரும் அம்சங்களை வழங்க வேண்டும்: கைமுறை தலையீட்டைக் குறைப்பதற்கான பல்துறை வீரியம், துல்லியமான சோதனை முடிவுகளுக்காக ரீஜெண்ட் போக்குவரத்தை அளவிடுவதற்கான தேவைக்கேற்ப வெளியீடு மற்றும் சுற்றுச்சூழல் அதிர்வுகளைத் தாங்கும் நம்பகமான செயல்திறன்.தற்போது, ​​மிகவும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் POCT சாதனம், நுண்துளை நைட்ரோசெல்லுலோஸ் சவ்வுகளின் பல அடுக்குகளைக் கொண்ட பக்கவாட்டு ஓட்டம் துண்டு 5,6 ஆகும், இது மிகச் சிறிய அளவிலான மாதிரியை முன்னோக்கித் தள்ளுகிறது, தந்துகி விசையால் முன்-அசைவு வினைகளுடன் வினைபுரிகிறது.குறைந்த விலை, எளிமையான பயன்பாடு மற்றும் விரைவான முடிவுகள் ஆகியவற்றின் நன்மைகள் இருந்தாலும், ஃப்ளோ ஸ்ட்ரிப்-அடிப்படையிலான POCT சாதனங்கள் பல-நிலை பகுப்பாய்வுகள் தேவையில்லாமல் உயிரியல் சோதனைகளுக்கு (எ.கா. குளுக்கோஸ் சோதனைகள்7,8 மற்றும் கர்ப்ப பரிசோதனைகள்9,10) மட்டுமே பயன்படுத்தப்படும்.எதிர்வினைகள் (எ.கா. பல வினைகளை ஏற்றுதல், கலவை, மல்டிபிளெக்சிங்).கூடுதலாக, திரவ இயக்கத்தைக் கட்டுப்படுத்தும் உந்து சக்திகள் (அதாவது, தந்துகி சக்திகள்) நல்ல நிலைத்தன்மையை வழங்குவதில்லை, குறிப்பாக தொகுதிகளுக்கு இடையே, மோசமான மறுஉற்பத்தித்திறன் 11 மற்றும் பக்கவாட்டு ஓட்டம் பட்டைகள் முதன்மையாக நல்ல கண்டறிதலுக்கு பயனுள்ளதாக இருக்கும்12,13.
மைக்ரோ மற்றும் நானோ அளவிலான விரிவாக்கப்பட்ட உற்பத்தித் திறன்கள், அளவு அளவீடுகளுக்கான மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் POCT சாதனங்களை உருவாக்குவதற்கான வாய்ப்புகளை உருவாக்கியுள்ளன.இடைமுகம் 18, 19 மற்றும் சேனல்கள் 20, 21, 22 வடிவவியலின் பண்புகளை சரிசெய்வதன் மூலம், இந்த சாதனங்களின் தந்துகி விசை மற்றும் ஓட்ட விகிதத்தை கட்டுப்படுத்தலாம்.இருப்பினும், அவற்றின் நம்பகத்தன்மை, குறிப்பாக அதிக ஈரமான திரவங்களுக்கு, உற்பத்தித் தவறுகள், பொருள் குறைபாடுகள் மற்றும் சுற்றுச்சூழல் அதிர்வுகளுக்கு உணர்திறன் காரணமாக ஏற்றுக்கொள்ள முடியாததாகவே உள்ளது.கூடுதலாக, திரவ-வாயு இடைமுகத்தில் ஒரு தந்துகி ஓட்டம் உருவாக்கப்படுவதால், கூடுதல் ஓட்டத்தை அறிமுகப்படுத்த முடியாது, குறிப்பாக மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் சேனலை திரவத்துடன் நிரப்பிய பிறகு.எனவே, மிகவும் சிக்கலான கண்டறிதலுக்கு, மாதிரி ஊசி பல படிகள் செய்யப்பட வேண்டும்24,25.
மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் சாதனங்களில், மையவிலக்கு மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் சாதனங்கள் தற்போது POCT26,27 க்கான சிறந்த தீர்வுகளில் ஒன்றாகும்.சுழற்சி வேகத்தை சரிசெய்வதன் மூலம் உந்து சக்தியை கட்டுப்படுத்த முடியும் என்பதில் அதன் இயக்கி நுட்பம் சாதகமானது.இருப்பினும், குறைபாடு என்னவென்றால், மையவிலக்கு விசை எப்போதும் சாதனத்தின் வெளிப்புற விளிம்பை நோக்கி செலுத்தப்படுகிறது, இது மிகவும் சிக்கலான பகுப்பாய்வுகளுக்குத் தேவையான பல-படி எதிர்வினைகளை செயல்படுத்த கடினமாக உள்ளது.மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் டோஸிங்கிற்கு கூடுதல் உந்து சக்திகள் (எ.கா. நுண்குழாய்கள் 28, 29 மற்றும் பல 30, 31, 32, 33, 34, 35) கூடுதலாக மையவிலக்கு விசை அறிமுகப்படுத்தப்பட்டாலும், இந்த கூடுதல் சக்திகள் பொதுவாக ஆர்டர்களாக இருப்பதால் எதிர்பாராத திரவப் பரிமாற்றம் இன்னும் நிகழலாம். மையவிலக்கு விசையை விட குறைவான அளவு, அவை சிறிய இயக்க வரம்புகளில் மட்டுமே பயனுள்ளதாக இருக்கும் அல்லது திரவ வெளியீட்டில் தேவைக்கேற்ப கிடைக்காது.மையவிலக்கு இயக்க முறைகள் 36, 37, 38, தெர்மோப்நியூமேடிக் முறைகள் 39 மற்றும் செயலில் உள்ள நியூமேடிக் முறைகள் 40 போன்ற மையவிலக்கு மைக்ரோஃப்ளூய்டிக்குகளில் நியூமேடிக் கையாளுதல்களை இணைப்பது ஒரு கவர்ச்சிகரமான மாற்றாக நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது.எதிர்-பியூகோடைனமிக் அணுகுமுறையுடன், கூடுதல் குழி மற்றும் இணைக்கும் மைக்ரோ சேனல்கள் வெளிப்புற மற்றும் உள் நடவடிக்கைகளுக்காக சாதனத்தில் ஒருங்கிணைக்கப்படுகின்றன, இருப்பினும் அதன் உந்தி செயல்திறன் (75% முதல் 90% வரை) உந்தி சுழற்சிகளின் எண்ணிக்கை மற்றும் பாகுத்தன்மையைப் பொறுத்தது. திரவத்தின்.தெர்மோப்நியூமேடிக் முறையில், லேடெக்ஸ் சவ்வு மற்றும் திரவப் பரிமாற்ற அறை ஆகியவை, சிக்கிய காற்றின் அளவு சூடுபடுத்தப்படும்போது அல்லது குளிர்விக்கப்படும்போது, ​​நுழைவாயிலை மூடுவதற்கு அல்லது மீண்டும் திறக்கும் வகையில் வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது.இருப்பினும், வெப்பமூட்டும்/குளிரூட்டும் அமைப்பு மெதுவான மறுமொழி சிக்கல்களை அறிமுகப்படுத்துகிறது மற்றும் தெர்மோசென்சிட்டிவ் மதிப்பீடுகளில் அதன் பயன்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்துகிறது (எ.கா., பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (PCR) பெருக்கம்).செயலில் உள்ள நியூமேடிக் அணுகுமுறையுடன், தேவைக்கேற்ப வெளியீடு மற்றும் உள்நோக்கிய இயக்கம் ஆகியவை ஒரே நேரத்தில் நேர்மறை அழுத்தம் மற்றும் அதிவேக மோட்டார்கள் மூலம் துல்லியமாக பொருந்திய சுழற்சி வேகம் ஆகியவற்றின் மூலம் அடையப்படுகின்றன.நியூமேடிக் ஆக்சுவேட்டர்கள் (நேர்மறை அழுத்தம் 41, 42 அல்லது எதிர்மறை அழுத்தம் 43) மற்றும் பொதுவாக மூடிய வால்வு வடிவமைப்புகளைப் பயன்படுத்தி மற்ற வெற்றிகரமான அணுகுமுறைகள் உள்ளன.நியூமேடிக் அறையில் தொடர்ச்சியாக அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், திரவமானது பெரிஸ்டால்டிகலாக முன்னோக்கி செலுத்தப்படுகிறது, மேலும் பொதுவாக மூடிய வால்வு பெரிஸ்டால்சிஸ் காரணமாக திரவத்தின் பின்னடைவைத் தடுக்கிறது, இதனால் சிக்கலான திரவ செயல்பாடுகளை உணர முடியும்.இருப்பினும், ஒரு குறிப்பிட்ட POCT சாதனத்தில் சிக்கலான திரவ செயல்பாடுகளைச் செய்யக்கூடிய குறைந்த எண்ணிக்கையிலான மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் தொழில்நுட்பங்கள் மட்டுமே உள்ளன, இதில் பல செயல்பாட்டு விநியோகம், தேவைக்கேற்ப வெளியீடு, நம்பகமான செயல்திறன், நீண்ட கால சேமிப்பு, அதிக பாகுத்தன்மை கொண்ட திரவங்களைக் கையாளுதல், மற்றும் செலவு குறைந்த உற்பத்தி.அனைத்தும் ஒரே நேரத்தில்.Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat மற்றும் Rhonda போன்ற சில வணிக POCT தயாரிப்புகள் மட்டுமே இன்றுவரை திறந்த சந்தையில் வெற்றிகரமாக அறிமுகப்படுத்தப்பட்டதற்கு பல-படி செயல்பாட்டு செயல்பாட்டின் பற்றாக்குறையும் ஒரு காரணமாக இருக்கலாம்.
இந்த தாளில், பச்சை வளைய மைக்ரோ சுவிட்ச் தொழில்நுட்பத்தின் (ஃபாஸ்ட்) அடிப்படையில் நியூமேடிக் மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் ஆக்சுவேட்டரை நாங்கள் முன்மொழிகிறோம்.FAST ஆனது மைக்ரோலிட்டர்கள் முதல் மில்லிலிட்டர்கள் வரையிலான பரவலான உலைகளுக்கு தேவையான அனைத்து பண்புகளையும் ஒரே நேரத்தில் ஒருங்கிணைக்கிறது.வேகமாக மீள் சவ்வுகள், நெம்புகோல்கள் மற்றும் தொகுதிகள் உள்ளன.காற்று அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்தாமல், சவ்வுகள், நெம்புகோல்கள் மற்றும் தொகுதிகள் இறுக்கமாக மூடப்பட்டு, உள்ளே இருக்கும் திரவத்தை நீண்ட நேரம் சேமிக்க முடியும்.தகுந்த அழுத்தம் கொடுக்கப்பட்டு நெம்புகோலின் நீளத்திற்கு சரிசெய்யப்படும் போது, ​​உதரவிதானம் விரிவடைந்து நெம்புகோலை திறந்த நிலைக்கு தள்ளுகிறது, இது திரவம் வழியாக செல்ல அனுமதிக்கிறது.இது ஒரு அடுக்கில், ஒரே நேரத்தில், வரிசையாக அல்லது தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட முறையில் திரவங்களின் மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் அளவீட்டை அனுமதிக்கிறது.
இன்ஃப்ளூயன்ஸா A மற்றும் B வைரஸ்களைக் (IAV மற்றும் IBV) கண்டறிவதற்கான பதில் மாதிரி முடிவுகளை உருவாக்க வேகத்தைப் பயன்படுத்தி PCR அமைப்பை உருவாக்கியுள்ளோம்.102 பிரதிகள்/எம்எல் கண்டறிதலின் குறைந்த வரம்பை (LOD) அடைந்துள்ளோம், எங்கள் மல்டிபிளக்ஸ் மதிப்பீடு IAV மற்றும் IBVக்கான தனித்தன்மையைக் காட்டியது மற்றும் இன்ஃப்ளூயன்ஸா வைரஸ் பாத்தோடைப்பிங்கை அனுமதித்தது.18 நோயாளிகள் மற்றும் 18 ஆரோக்கியமான நபர்களிடமிருந்து நாசி ஸ்வாப் மாதிரியைப் பயன்படுத்தி மருத்துவ பரிசோதனை முடிவுகள் நிலையான RT-PCR (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஃப்ளோரசன் தீவிரத்தில் நல்ல ஒத்திசைவைக் காட்டுகின்றன.18 நோயாளிகள் மற்றும் 18 ஆரோக்கியமான நபர்களிடமிருந்து நாசி ஸ்வாப் மாதிரியைப் பயன்படுத்தி மருத்துவ பரிசோதனை முடிவுகள் நிலையான RT-PCR (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஃப்ளோரசன் தீவிரத்தில் நல்ல ஒத்திசைவைக் காட்டுகின்றன.18 ஆம் தேதி முதல் 18 வரையிலான காலகட்டங்களில் ஹோரோஷீ சௌட்வெட்ஸ்ட்வி இன்டென்சிவ்னோஸ்டி ஃபுளூரெஸ்ஸென்சிஸ் ஸ்டாண்டார்ட்னோய் ஓட்-பட்ட் (கோஃப்ஃபீட்ஸ், 90).18 நோயாளிகள் மற்றும் 18 ஆரோக்கியமான நபர்களிடமிருந்து நாசி ஸ்வாப் மாதிரியைப் பயன்படுத்தி மருத்துவ பரிசோதனைகளின் முடிவுகள் நிலையான RT-PCR இன் ஒளிரும் தீவிரத்திற்கு இடையே நல்ல உடன்பாட்டைக் காட்டுகின்றன (பியர்சனின் குணகங்கள் > 0.9).0.9) ............................... ரெஸுல்டட் கிளீனிக்ஸ் இஸ்போல்சோவனிம் ஒப்ராஸியோவ் நாசால்னிஹ் மாஸ்கோவில் இருந்து 18 பிஸியோன்டோவ் ஹோரோஷீ சௌட்வெட்ஸ்ட்வி மெஷடு இன்டென்சிவ்னோஸ்டியூ ஃபுளூரெஸ்சென்சி மற்றும் ஸ்டாண்டார்ட்னோய் ஓட்-பட் > (கோஷ்,9).18 நோயாளிகள் மற்றும் 18 ஆரோக்கியமான நபர்களிடமிருந்து நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி மருத்துவ பரிசோதனைகளின் முடிவுகள் ஒளிரும் தீவிரம் மற்றும் நிலையான RT-PCR (பியர்சனின் குணகம்> 0.9) ஆகியவற்றுக்கு இடையே நல்ல உடன்பாட்டைக் காட்டின.FAST-POCT சாதனத்தின் மதிப்பிடப்பட்ட பொருள் விலை தோராயமாக US$1 (துணை அட்டவணை 1) மற்றும் பெரிய அளவிலான உற்பத்தி முறைகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் (எ.கா. இன்ஜெக்ஷன் மோல்டிங்) மேலும் குறைக்கப்படலாம்.உண்மையில், FAST-அடிப்படையிலான POCT சாதனங்கள் WHO ஆல் கட்டாயப்படுத்தப்பட்ட தேவையான அனைத்து அம்சங்களையும் கொண்டிருக்கின்றன மற்றும் POCT அமைப்புகளின் முதுகெலும்பாக இருக்கும் பிளாஸ்மா வெப்ப சைக்கிள் ஓட்டுதல்44, பெருக்கம் இல்லாத இம்யூனோஅசேஸ்45 மற்றும் நானோபாடி செயல்பாட்டு சோதனைகள்46 போன்ற புதிய உயிர்வேதியியல் சோதனை முறைகளுடன் இணக்கமாக உள்ளன.சாத்தியம்.
அத்திப்பழத்தில்.1a ஃபாஸ்ட்-POCT இயங்குதளத்தின் கட்டமைப்பைக் காட்டுகிறது, இதில் நான்கு திரவ அறைகள் உள்ளன: முன் சேமிப்பு அறை, ஒரு கலவை அறை, ஒரு எதிர்வினை அறை மற்றும் ஒரு கழிவு அறை.திரவ ஓட்டத்தை கட்டுப்படுத்துவதற்கான திறவுகோல் வேகமான வடிவமைப்பு (மீள் சவ்வுகள், நெம்புகோல்கள் மற்றும் தொகுதிகள் கொண்டது) முன் சேமிப்பு அறை மற்றும் கலவை அறையில் அமைந்துள்ளது.காற்றோட்டமாக செயல்படும் முறையாக, ஃபாஸ்ட் வடிவமைப்பு துல்லியமான திரவ ஓட்டக் கட்டுப்பாட்டை வழங்குகிறது, இதில் மூடிய/திறந்த மாறுதல், பல்துறை அளவு, தேவைக்கேற்ப திரவ வெளியீடு, நம்பகமான செயல்பாடு (எ.கா., சுற்றுச்சூழல் அதிர்வுக்கு உணர்வின்மை) மற்றும் நீண்ட கால சேமிப்பு ஆகியவை அடங்கும்.FAST-POCT இயங்குதளம் நான்கு அடுக்குகளைக் கொண்டுள்ளது: ஒரு பேக்கிங் லேயர், ஒரு மீள் பட அடுக்கு, ஒரு பிளாஸ்டிக் ஃபிலிம் லேயர் மற்றும் ஒரு கவர் லேயர், படம் 1b இல் பெரிதாக்கப்பட்ட காட்சியில் காட்டப்பட்டுள்ளது (துணை புள்ளிவிவரங்கள் S1 மற்றும் S2 இல் விரிவாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது. )அனைத்து சேனல்கள் மற்றும் திரவ போக்குவரத்து அறைகள் (முன்-சேமிப்பு மற்றும் எதிர்வினை அறைகள் போன்றவை) 0.2 மிமீ (மெல்லிய பகுதி) முதல் 5 மிமீ தடிமன் வரையிலான பிஎல்ஏ (பாலிலாக்டிக் அமிலம்) அடி மூலக்கூறுகளில் உட்பொதிக்கப்பட்டுள்ளன.மீள் படப் பொருள் என்பது 300 µm தடிமன் கொண்ட PDMS ஆகும், இது அதன் "மெல்லிய தடிமன்" மற்றும் குறைந்த நெகிழ்ச்சித் தன்மை (சுமார் 2.25 MPa47) காரணமாக காற்றழுத்தம் பயன்படுத்தப்படும் போது எளிதில் விரிவடைகிறது.பாலிஎதிலீன் பட அடுக்கு 100 µm தடிமன் கொண்ட பாலிஎதிலீன் டெரெப்தாலேட்டால் (PET) ஆனது, காற்றழுத்தத்தால் ஏற்படும் அதிகப்படியான சிதைவிலிருந்து மீள் படத்தைப் பாதுகாக்கிறது.அறைகளுடன் தொடர்புடையது, அடி மூலக்கூறு அடுக்கு திரவ ஓட்டத்தை கட்டுப்படுத்த கீல்கள் மூலம் கவர் லேயருடன் (பிஎல்ஏவால் ஆனது) இணைக்கப்பட்ட நெம்புகோல்களைக் கொண்டுள்ளது.மீள் படம் இரட்டை பக்க பிசின் டேப்பை (ARseal 90880) பயன்படுத்தி பேக்கிங் லேயரில் ஒட்டப்பட்டு ஒரு பிளாஸ்டிக் படத்துடன் மூடப்பட்டது.கவர் லேயரில் டி-கிளிப் வடிவமைப்பைப் பயன்படுத்தி ஒரு அடி மூலக்கூறில் மூன்று அடுக்குகள் கூடியிருந்தன.டி-கிளாம்ப் இரண்டு கால்களுக்கு இடையில் ஒரு இடைவெளியைக் கொண்டுள்ளது.கிளிப் பள்ளத்தில் செருகப்பட்டபோது, ​​இரண்டு கால்களும் சிறிது வளைந்து, பின்னர் அவற்றின் அசல் நிலைக்குத் திரும்பி, அவை பள்ளம் வழியாகச் செல்லும்போது மூடி மற்றும் பின்புறத்தை இறுக்கமாக பிணைத்தன (துணை படம். S1).நான்கு அடுக்குகள் பின்னர் இணைப்பிகளைப் பயன்படுத்தி கூடியிருக்கின்றன.
ஃபாஸ்டின் பல்வேறு செயல்பாட்டு பெட்டிகள் மற்றும் அம்சங்களை விளக்கும் தளத்தின் திட்ட வரைபடம்.b FAST-POCT தளத்தின் விரிவாக்கப்பட்ட வரைபடம்.c அமெரிக்க கால் டாலர் நாணயத்திற்கு அடுத்துள்ள மேடையின் புகைப்படம்.
FAST-POCT இயங்குதளத்தின் வேலை செய்யும் பொறிமுறையானது படம் 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது. முக்கிய கூறுகள் அடிப்படை அடுக்கில் உள்ள தொகுதிகள் மற்றும் கவர் லேயரில் உள்ள கீல்கள் ஆகும், இதன் விளைவாக நான்கு அடுக்குகள் T- வடிவத்தைப் பயன்படுத்தி ஒருங்கிணைக்கப்படும் போது குறுக்கீடு வடிவமைப்பு ஏற்படுகிறது. .காற்றழுத்தம் பயன்படுத்தப்படாதபோது (fig. 2a), குறுக்கீடு பொருத்தம் கீலை வளைத்து சிதைக்கச் செய்கிறது, மேலும் நெம்புகோல் வழியாக ஒரு சீல் விசை பயன்படுத்தப்பட்டு, பிளாக்கிற்கு எதிராக மீள் படத்தை அழுத்தி, சீல் குழியில் உள்ள திரவம் வரையறுக்கப்படுகிறது. சீல் செய்யப்பட்ட மாநிலமாக.படம் 2a இல் பக்கக் காட்சியில் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, இந்த நிலையில், நெம்புகோல் வெளிப்புறமாக வளைந்திருப்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.காற்று வழங்கப்படும் போது (படம் 2b), மீள் சவ்வு வெளிப்புறமாக கவர் நோக்கி விரிவடைகிறது மற்றும் நெம்புகோலை மேலே தள்ளுகிறது, இதனால் நெம்புகோலுக்கும் பிளாக்கும் இடையே உள்ள இடைவெளியை திறந்து அடுத்த அறைக்குள் திரவம் பாயும், இது திறந்த நிலை என வரையறுக்கப்படுகிறது. .காற்று அழுத்தத்தை வெளியிட்ட பிறகு, நெம்புகோல் அதன் அசல் நிலைக்குத் திரும்பலாம் மற்றும் கீலின் நெகிழ்ச்சி காரணமாக இறுக்கமாக இருக்கும்.நெம்புகோல் இயக்கங்களின் வீடியோக்கள் துணைத் திரைப்படம் S1 இல் வழங்கப்படுகின்றன.
A. மூடியிருக்கும் போது திட்ட வரைபடம் மற்றும் புகைப்படங்கள்.அழுத்தம் இல்லாத நிலையில், நெம்புகோல் தடுப்புக்கு எதிராக சவ்வை அழுத்துகிறது, மேலும் திரவமானது சீல் செய்யப்படுகிறது.b நல்ல நிலையில் உள்ளது.அழுத்தம் கொடுக்கப்படும் போது, ​​சவ்வு விரிவடைந்து நெம்புகோலை மேலே தள்ளுகிறது, அதனால் சேனல் திறக்கிறது மற்றும் திரவம் பாயலாம்.c முக்கியமான அழுத்தத்தின் சிறப்பியல்பு அளவைத் தீர்மானிக்கவும்.சிறப்பியல்பு பரிமாணங்களில் நெம்புகோலின் நீளம் (எல்), ஸ்லைடருக்கும் கீலுக்கும் இடையே உள்ள தூரம் (எல்) மற்றும் நெம்புகோல் புரோட்ரூஷனின் தடிமன் (டி) ஆகியவை அடங்கும்.Fs என்பது த்ரோட்டில் புள்ளி B. q என்பது நெம்புகோலில் ஒரே சீராக விநியோகிக்கப்படும் சுமை.Tx* என்பது கீல் நெம்புகோலால் உருவாக்கப்பட்ட முறுக்குவிசையைக் குறிக்கிறது.முக்கியமான அழுத்தம் என்பது நெம்புகோலை உயர்த்துவதற்கும் திரவத்தை ஓட்டுவதற்கும் தேவைப்படும் அழுத்தம்.d முக்கியமான அழுத்தம் மற்றும் உறுப்பு அளவு ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான உறவின் தத்துவார்த்த மற்றும் சோதனை முடிவுகள்.n = 6 சுயாதீன சோதனைகள் செய்யப்பட்டன மற்றும் தரவு ± நிலையான விலகலாகக் காட்டப்படுகிறது.மூல தரவு மூல தரவு கோப்புகளாக வழங்கப்படுகிறது.
பீம் கோட்பாட்டின் அடிப்படையில் ஒரு பகுப்பாய்வு மாதிரி உருவாக்கப்பட்டுள்ளது, இதில் முக்கியமான அழுத்தம் பிசியின் சார்புநிலையை பகுப்பாய்வு செய்ய வடிவியல் அளவுருக்களில் இடைவெளி திறக்கிறது (உதாரணமாக, L என்பது நெம்புகோலின் நீளம், l என்பது தொகுதிக்கும் இடையே உள்ள தூரம். கீல், S என்பது நெம்புகோல் திரவத்துடன் தொடர்பு பகுதி t என்பது நெம்புகோல் புரோட்ரூஷனின் தடிமன் ஆகும், படம் 2c இல் காட்டப்பட்டுள்ளது).துணைக் குறிப்புகள் மற்றும் துணைப் படம் S3 இல் விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி, \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), Fs முறுக்கு விசையாக இருக்கும் போது இடைவெளி திறக்கும். \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) குறுக்கீடு பொருத்தத்துடன் தொடர்புடைய சக்திகளை அகற்றி, கீலை வளைக்கச் செய்கிறது.சோதனை பதில் மற்றும் பகுப்பாய்வு மாதிரியானது நல்ல உடன்பாட்டைக் காட்டுகிறது (படம். 2d), t/l ஐ அதிகரிப்பதன் மூலம் முக்கியமான அழுத்தம் Pc அதிகரிக்கிறது மற்றும் L குறைகிறது, இது கிளாசிக்கல் பீம் மாதிரியால் எளிதாக விளக்கப்படுகிறது, அதாவது t/Lift உடன் முறுக்கு அதிகரிக்கிறது. .எனவே, எங்கள் கோட்பாட்டு பகுப்பாய்வு, நெம்புகோல் நீளம் L மற்றும் t/l விகிதத்தை சரிசெய்வதன் மூலம் முக்கியமான அழுத்தத்தை திறம்பட கட்டுப்படுத்த முடியும் என்பதை தெளிவாகக் காட்டுகிறது, இது FAST-POCT தளத்தின் வடிவமைப்பிற்கு ஒரு முக்கிய அடிப்படையை வழங்குகிறது.
FAST-POCT இயங்குதளமானது மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் விநியோகத்தை வழங்குகிறது (படம் 3a இல் உள்ளீடு மற்றும் பரிசோதனையுடன் காட்டப்பட்டுள்ளது), இது வெற்றிகரமான POCT இன் மிக முக்கியமான அம்சமாகும், இதில் திரவங்கள் எந்த திசையிலும் எந்த வரிசையிலும் (கேஸ்கேட், ஒரே நேரத்தில், வரிசையாக) அல்லது தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மல்டிசேனல் விநியோகம் .- வீரியம் செயல்பாடு.அத்திப்பழத்தில்.3a(i) ஒரு அடுக்கடுக்கான டோசிங் பயன்முறையைக் காட்டுகிறது, இதில் இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட அறைகள் பல்வேறு எதிர்வினைகளை பிரிக்க தொகுதிகள் மற்றும் திறந்த மற்றும் மூடிய நிலைகளைக் கட்டுப்படுத்த ஒரு நெம்புகோலைப் பயன்படுத்தி அடுக்கி வைக்கப்படுகின்றன.அழுத்தம் கொடுக்கப்படும் போது, ​​திரவமானது மேல் பகுதியிலிருந்து கீழ் அறைக்கு அடுக்கடுக்காக பாய்கிறது.அடுக்கு அறைகள் ஈரமான இரசாயனங்கள் அல்லது லியோபிலைஸ் செய்யப்பட்ட பொடிகள் போன்ற உலர் இரசாயனங்களால் நிரப்பப்படலாம் என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.படம் 3a(i) இல் உள்ள சோதனையில், மேல் அறையிலிருந்து சிவப்பு மை நீல சாயப் பொடியுடன் (தாமிர சல்பேட்) இரண்டாவது அறைக்குள் பாய்ந்து கீழ் அறையை அடையும் போது கருநீலமாக மாறும்.பம்ப் செய்யப்படும் திரவத்திற்கான கட்டுப்பாட்டு அழுத்தத்தையும் இது காட்டுகிறது.இதேபோல், ஒரு நெம்புகோல் இரண்டு அறைகளுடன் இணைக்கப்பட்டால், அது படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, ஒரே நேரத்தில் உட்செலுத்துதல் பயன்முறையாக மாறும்.3a(ii), இதில் அழுத்தம் கொடுக்கப்படும் போது திரவமானது இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட அறைகளில் ஒரே சீராக விநியோகிக்கப்படும்.முக்கியமான அழுத்தம் நெம்புகோலின் நீளத்தைப் பொறுத்தது என்பதால், நெம்புகோலின் நீளத்தை அத்தியில் காட்டப்பட்டுள்ளபடி தொடர்ச்சியான ஊசி வடிவத்தை அடைய சரிசெய்யலாம்.3a(iii).ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_long) அறை B உடன் இணைக்கப்பட்டது மற்றும் ஒரு குறுகிய நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தம் Pc_short > Pc_long) அறை A உடன் இணைக்கப்பட்டது. அழுத்தம் P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) பயன்படுத்தப்பட்டதால், சிவப்பு நிறத்தில் உள்ள திரவம் மட்டுமே. அறை B க்கு பாயலாம் மற்றும் அழுத்தம் P2 (> Pc_short) ஆக அதிகரித்த போது, ​​நீல திரவமானது அறை A க்கு பாயலாம். இந்த வரிசை ஊசி முறையானது வெவ்வேறு திரவங்களை அவற்றின் தொடர்புடைய அறைகளுக்கு வரிசையாக மாற்றும், இது ஒரு வெற்றிகரமான POCTக்கு முக்கியமானதாகும். சாதனம்.ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_long) அறை B உடன் இணைக்கப்பட்டது மற்றும் ஒரு குறுகிய நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தம் Pc_short > Pc_long) அறை A உடன் இணைக்கப்பட்டது. அழுத்தம் P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) பயன்படுத்தப்பட்டதால், சிவப்பு நிறத்தில் உள்ள திரவம் மட்டுமே. அறை B க்கு பாயலாம் மற்றும் அழுத்தம் P2 (> Pc_short) ஆக அதிகரித்த போது, ​​நீல திரவமானது அறை A க்கு பாயலாம். இந்த வரிசை ஊசி முறையானது வெவ்வேறு திரவங்களை அவற்றின் தொடர்புடைய அறைகளுக்கு வரிசையாக மாற்றும், இது ஒரு வெற்றிகரமான POCTக்கு முக்கியமானதாகும். சாதனம்.ஜல்லிக்கட்டு யோல் சோடினென் காமெரோய் ஏ. பிரை ப்ரிலோஜெனி டவ்லேனியா பி1 (பிசி_லாங் < பி1 < பிசி_ஷார்ட்) டோல்கோ ஜிட்கோஸ்ட், வீடியோக்கள் камеру b, re 2 (> pc_shord) срநிலையான !ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தம் Pc_long உடன்) அறை B உடன் இணைக்கப்பட்டது, மேலும் ஒரு குறுகிய நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தம் Pc_short > Pc_long) அறை A உடன் இணைக்கப்பட்டது. அழுத்தம் P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) பயன்படுத்தப்படும் போது, ​​திரவம் மட்டும் சிறப்பிக்கப்படுகிறது. சிவப்பு நிறத்தில் அறை B க்குள் பாயலாம், மேலும் அழுத்தம் P2 (> Pc_short) ஆக அதிகரிக்கப்பட்டால், நீல திரவமானது அறை A க்குள் பாயலாம். இந்த வரிசை ஊசி முறை வெவ்வேறு திரவங்களுக்கு தொடர்ச்சியாக அந்தந்த அறைகளுக்கு மாற்றப்படும், இது முக்கியமானது. வெற்றிகரமான POCTக்கு.சாதனம். டிலினி ரைச்சாக் (கிரிட்டிசஸ்கோ டேவ்லேனி பிசி_லாங்) கேமரோய் ஏ.நீண்ட கை (முக்கிய அழுத்தம் Pc_long) அறை B உடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் குறுகிய கை (முக்கிய அழுத்தம் Pc_short > Pc_long) அறை A உடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது.P1 (Pc_long < P1 <Pc_short) о P2 (> Pc_short) காமெரு ஒரு மொஜெட் போஸ்டுபட் சீன ஜிட்கோஸ்ட்.அழுத்தம் P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) பயன்படுத்தப்படும் போது, ​​சிவப்பு நிற திரவம் மட்டுமே அறை B க்குள் நுழைய முடியும், மேலும் அழுத்தம் P2 (> Pc_short) ஆக அதிகரிக்கும் போது, ​​நீல திரவம் அறை A க்குள் நுழைய முடியும். இந்த வரிசை ஊசி முறை வரிசைமுறை பரிமாற்றத்திற்கு ஏற்றது அந்தந்த அறைகளுக்குள் பல்வேறு திரவங்கள், POCT சாதனத்தின் வெற்றிகரமான செயல்பாட்டிற்கு முக்கியமானதாகும்.படம் 3a(iv) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உட்செலுத்துதல் பயன்முறையை நிரூபிக்கிறது, இதில் பிரதான அறை ஒரு குறுகிய (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_short) மற்றும் ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_long <Pc_short) முறையே அறை A மற்றும் அறை B உடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது. அறை B உடன் இணைக்கப்பட்ட மற்றொரு ஏர் சேனலுக்கு. திரவத்தை அறை Aக்கு மாற்ற, P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) மற்றும் P1 + P2 > Pc_short உடன் P2 (P2 > P1) ஆகியவை ஒரே நேரத்தில் சாதனத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டன.படம் 3a(iv) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உட்செலுத்துதல் பயன்முறையை நிரூபிக்கிறது, இதில் பிரதான அறை ஒரு குறுகிய (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_short) மற்றும் ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தத்துடன் Pc_long Pc_short உடன் P2 (P2 > P1) ஆகியவை ஒரே நேரத்தில் சாதனத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டன.அத்திப்பழத்தில்.3а(iv) பொகசன் ரெஜிம் செலக்டிவ்னோகோ விப்ரிஸ்கா, ப்ரி கோட்டோரம் ஆஸ்னோவனா கேமரா இமேலா கொரோட்கி ய் ரைச்சக் (ஸ் கிரிட்டிசெஸ்கிம் டேவ்லெனிம் பிசி_லாங் < பிசி_ஷார்ட்), கோட்டரி டோபோல்னிடல் சோடினியலிஸ் எஸ் கேமெரோய் ஏ மற்றும் கேம்.3a(iv) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உட்செலுத்துதல் பயன்முறையைக் காட்டுகிறது, இதில் பிரதான அறை ஒரு குறுகிய (முக்கியமான அழுத்தத்துடன் Pc_short) மற்றும் ஒரு நீண்ட நெம்புகோல் (முக்கிய அழுத்தம் Pc_long P1), где P1 + P2 > Pc_short.அறை B உடன் இணைக்கப்பட்ட மற்றொரு காற்று சேனலுக்கு. முதலில் அறை Aக்கு திரவத்தை மாற்ற, P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) மற்றும் P2 (P2 > P1) அழுத்தங்கள் ஒரே நேரத்தில் சாதனத்தில் பயன்படுத்தப்பட்டன, அங்கு P1 + P2 > Pc_short. 3а с сержень (кр தெரிவித்த оздушномо каналர்க்கான பி.3a(iv) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உட்செலுத்துதல் பயன்முறையைக் காட்டுகிறது, பிரதான அறையில் ஒரு குறுகிய தண்டு (முக்கியமான அழுத்தம் Pc_short) மற்றும் ஒரு நீண்ட தண்டு (முக்கிய அழுத்தம் Pc_long <Pc_short) முறையே அறை A மற்றும் அறை B ஆகியவற்றுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது, மேலும் மற்றொரு காற்றுப் பாதையுடன் கூடுதலாக, B அறையுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது.இதனால், பி2 திரவத்தை அறை Bக்குள் நுழைவதைத் தடுக்கிறது;இதற்கிடையில், அறை A க்கு திரவ ஓட்டத்தை அனுமதிக்க, அறை A உடன் இணைக்கப்பட்ட குறுகிய நெம்புகோலை செயல்படுத்த, மொத்த அழுத்தம் P1 + P2 முக்கிய அழுத்தத்தை மீறியது. பின்னர், அறை B ஐ நிரப்ப வேண்டியிருக்கும் போது, ​​நாம் P1 (Pc_long <) பயன்படுத்த வேண்டும். P1 <Pc_short) பிரதான அறையில் நீண்ட நெம்புகோலைச் செயல்படுத்தி, B அறைக்கு திரவம் பாய அனுமதிக்கப்படுகிறது. t = 3 வி முதல் 9 வி அழுத்தம் P1 பயன்படுத்தப்படும் போது B.இதற்கிடையில், அறை A க்கு திரவ ஓட்டத்தை அனுமதிக்க, அறை A உடன் இணைக்கப்பட்ட குறுகிய நெம்புகோலை செயல்படுத்த, மொத்த அழுத்தம் P1 + P2 முக்கிய அழுத்தத்தை மீறியது. பின்னர், அறை B ஐ நிரப்ப வேண்டியிருக்கும் போது, ​​நாம் P1 (Pc_long <) பயன்படுத்த வேண்டும். P1 அதே நேரத்தில், மொத்த அழுத்தம் P1 + P2 முக்கியமான அழுத்தத்தை மீறுகிறது, இது அறை A-க்குள் திரவம் பாய அனுமதிக்கும் குறுகிய நெம்புகோல் இணைக்கும் அறையை இயக்குகிறது.அறை A ஐ நிரப்புவதற்கான நேரம் வரும்போது, ​​பிரதான அறையில் P1 மற்றும் இரண்டாம் நிலை அறையில் P2 ஐப் பயன்படுத்துவோம்.இந்த வழியில், A மற்றும் B கேமராக்களுக்கு இடையே ஓட்ட நடத்தை தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட முறையில் மாறலாம். நான்கு பல-செயல்பாட்டு விநியோக முறைகளின் ஓட்டம் நடத்தை துணை திரைப்படம் S2 இல் காணலாம்.
மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் அசைன்மென்ட்டின் விளக்கப்படம், அதாவது (i) கேஸ்கேடிங், (ii) ஒரே நேரத்தில், (iii) வரிசைமுறை மற்றும் (iv) தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பணி.வளைவுகள் இந்த நான்கு விநியோக முறைகளின் பணிப்பாய்வு மற்றும் அளவுருக்களைக் குறிக்கின்றன.b டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர் மற்றும் எத்தனாலில் நீண்ட கால சேமிப்பு சோதனைகளின் முடிவுகள்.n = 5 சுயாதீன சோதனைகள் செய்யப்பட்டன மற்றும் தரவு ± sd c ஆகக் காட்டப்படுகிறது.வேகமான சாதனம் மற்றும் தந்துகி வால்வு (CV) சாதனம் (i) நிலையான மற்றும் (ii) அதிர்வு நிலைகளில் இருக்கும்போது நிலைத்தன்மை சோதனை ஆர்ப்பாட்டங்கள்.(iii) பல்வேறு கோண அதிர்வெண்களில் வேகம் மற்றும் CV சாதனங்களுக்கான வால்யூம் வெர்சஸ் நேரம்.d (i) வேகமான சாதனம் மற்றும் (ii) CV சாதனத்தின் தேவைக்கேற்ப சோதனை முடிவுகளை வெளியிடுதல்.(iii) இடைப்பட்ட அழுத்த பயன்முறையைப் பயன்படுத்தும் வேகம் மற்றும் CV சாதனங்களுக்கான ஒலியளவு மற்றும் நேரத்திற்கு இடையேயான தொடர்பு.அனைத்து அளவிலான பார்கள், 1 செ.மீ.மூல தரவு மூல தரவு கோப்புகளாக வழங்கப்படுகிறது.
ரியாஜெண்டுகளின் நீண்ட கால சேமிப்பானது வெற்றிகரமான POCT சாதனத்தின் மற்றொரு முக்கிய அம்சமாகும், இது பயிற்சி பெறாத பணியாளர்கள் பல வினைகளை கையாள அனுமதிக்கும்.பல தொழில்நுட்பங்கள் நீண்ட கால சேமிப்பிற்கான தங்கள் திறனைக் காட்டுகின்றன (எ.கா., 35 மைக்ரோ டிஸ்பென்சர்கள், 48 ப்ளிஸ்டர் பேக்குகள் மற்றும் 49 ஸ்டிக் பேக்குகள்), தொகுப்பிற்கு இடமளிக்க ஒரு பிரத்யேக பெறும் பெட்டி தேவைப்படுகிறது, இது செலவு மற்றும் சிக்கலை அதிகரிக்கிறது;மேலும், இந்த சேமிப்பக வழிமுறைகள் தேவைக்கேற்ப விநியோகிக்க அனுமதிக்காது மற்றும் பேக்கேஜிங்கில் எஞ்சியிருப்பதால் வினைப்பொருட்களை வீணாக்குகிறது.சிஎன்சி-இயந்திரம் செய்யப்பட்ட பிஎம்எம்ஏ மெட்டீரியலைப் பயன்படுத்தி அதன் லேசான கடினத்தன்மை மற்றும் வாயு ஊடுருவலுக்கு எதிர்ப்பு (துணை படம் எஸ் 5) காரணமாக நீண்ட கால சேமிப்பு திறன் சரிபார்க்கப்பட்டது.சோதனைக் கருவி 9 நாட்களுக்கு 65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர் (டீயோனைஸ்டு நீர்) மற்றும் 70% எத்தனால் (கொந்தளிப்பான எதிர்வினைகளை உருவகப்படுத்துதல்) ஆகியவற்றால் நிரப்பப்பட்டது.டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட நீர் மற்றும் எத்தனால் இரண்டும் மேலே இருந்து அணுகலைத் தடுக்க அலுமினியத் தாளைப் பயன்படுத்தி சேமிக்கப்பட்டன.50,51 இலக்கியத்தில் தெரிவிக்கப்பட்டுள்ள அர்ஹீனியஸ் சமன்பாடு மற்றும் ஊடுருவல் செயல்படுத்தும் ஆற்றல் ஆகியவை நிகழ்நேர சமமானதைக் கணக்கிடப் பயன்படுத்தப்பட்டன.அத்திப்பழத்தில்.9 நாட்களுக்கு 65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் சேமிக்கப்பட்ட 5 மாதிரிகளின் சராசரி எடை இழப்பு முடிவுகளை 3b காட்டுகிறது, டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட தண்ணீருக்கு 0.30% மற்றும் 23 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 70% எத்தனால் 0.72%.
அத்திப்பழத்தில்.3c அதிர்வு சோதனையைக் காட்டுகிறது.தற்போதுள்ள POCT28,29 சாதனங்களில் தந்துகி வால்வு (CV) மிகவும் பிரபலமான திரவ கையாளுதல் முறையாக இருப்பதால், ஒப்பிடுவதற்கு 300 µm அகலமும் 200 µm ஆழமும் கொண்ட CV சாதனம் பயன்படுத்தப்பட்டது.இரண்டு சாதனங்களும் நிலையாக இருக்கும் போது, ​​FAST-POCT இயங்குதளத்தில் உள்ள திரவம் முத்திரைகள் மற்றும் CV சாதனத்தில் உள்ள திரவம் சேனலின் திடீர் விரிவாக்கம் காரணமாக பூட்டப்படுவதைக் காணலாம், இது தந்துகி சக்திகளைக் குறைக்கிறது.இருப்பினும், ஆர்பிட்டல் வைப்ரேட்டரின் கோண அதிர்வெண் அதிகரிக்கும் போது, ​​FAST-POCT இயங்குதளத்தில் உள்ள திரவம் சீல் வைக்கப்பட்டிருக்கும், ஆனால் CV சாதனத்தில் உள்ள திரவம் கீழ் அறைக்குள் பாய்கிறது (Supplementary Movie S3 ஐயும் பார்க்கவும்).FAST-POCT இயங்குதளத்தின் சிதைக்கக்கூடிய கீல்கள் அறையில் உள்ள திரவத்தை இறுக்கமாக மூடுவதற்கு தொகுதிக்கு ஒரு வலுவான இயந்திர சக்தியைப் பயன்படுத்த முடியும் என்று இது அறிவுறுத்துகிறது.இருப்பினும், CV சாதனங்களில், திட, காற்று மற்றும் திரவ நிலைகளுக்கு இடையே உள்ள சமநிலை காரணமாக திரவம் தக்கவைக்கப்படுகிறது, உறுதியற்ற தன்மையை உருவாக்குகிறது, மேலும் அதிர்வுகள் சமநிலையை சீர்குலைத்து எதிர்பாராத ஓட்ட நடத்தையை ஏற்படுத்தும்.FAST-POCT இயங்குதளத்தின் நன்மை என்னவென்றால், இது நம்பகமான செயல்பாட்டை வழங்குகிறது மற்றும் டெலிவரி மற்றும் செயல்பாட்டின் போது பொதுவாக ஏற்படும் அதிர்வுகளின் முன்னிலையில் தோல்விகளைத் தவிர்க்கிறது.
FAST-POCT இயங்குதளத்தின் மற்றொரு முக்கியமான அம்சம், அதன் தேவைக்கேற்ப வெளியீடு ஆகும், இது அளவு பகுப்பாய்வுக்கான முக்கியத் தேவையாகும்.அத்திப்பழத்தில்.3d ஆனது FAST-POCT இயங்குதளம் மற்றும் CV சாதனத்தின் தேவைக்கேற்ப வெளியீட்டை ஒப்பிடுகிறது.அத்திப்பழத்திலிருந்து.3d(iii) வேகமான சாதனம் அழுத்த சமிக்ஞைக்கு விரைவாக பதிலளிப்பதைக் காண்கிறோம்.FAST-POCT இயங்குதளத்திற்கு அழுத்தம் கொடுக்கப்பட்டபோது, ​​திரவம் பாய்ந்தது, அழுத்தம் வெளியிடப்பட்டதும், ஓட்டம் உடனடியாக நிறுத்தப்பட்டது (படம். 3d(i)).இந்தச் செயலை கீலின் விரைவான மீள் திரும்பப் பெறுவதன் மூலம் விளக்கலாம், இது நெம்புகோலைத் தொகுதிக்கு எதிராக மீண்டும் அழுத்தி, அறையை மூடுகிறது.இருப்பினும், CV சாதனத்தில் திரவம் தொடர்ந்து பாய்ந்தது, இறுதியில் அழுத்தம் வெளியிடப்பட்ட பிறகு எதிர்பாராத திரவ அளவு சுமார் 100 μl ஆனது (படம் 3d(ii) மற்றும் துணைத் திரைப்படம் S4).முதல் ஊசிக்குப் பிறகு சி.வி.யை முழுமையாக ஈரப்படுத்திய பின் தந்துகி பின்னிங் விளைவு காணாமல் போவதன் மூலம் இதை விளக்கலாம்.
ஒரே சாதனத்தில் மாறுபடும் ஈரத்தன்மை மற்றும் பாகுத்தன்மை கொண்ட திரவங்களைக் கையாளும் திறன் POCT பயன்பாடுகளுக்கு சவாலாக உள்ளது.மோசமான ஈரத்தன்மை சேனல்களில் கசிவுகள் அல்லது பிற எதிர்பாராத ஓட்டம் நடத்தைக்கு வழிவகுக்கும், மேலும் அதிக பிசுபிசுப்பான திரவங்களைத் தயாரிக்க பெரும்பாலும் சுழல் கலவைகள், மையவிலக்குகள் மற்றும் வடிகட்டிகள் போன்ற துணை உபகரணங்கள் தேவைப்படுகின்றன 52 .முக்கியமான அழுத்தம் மற்றும் திரவ பண்புகளுக்கு இடையிலான உறவை நாங்கள் சோதித்தோம் (பரந்த அளவிலான ஈரத்தன்மை மற்றும் பாகுத்தன்மையுடன்).முடிவுகள் அட்டவணை 1 மற்றும் வீடியோ S5 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.வெவ்வேறு ஈரப்பதம் மற்றும் பாகுத்தன்மை கொண்ட திரவங்கள் அறையில் அடைக்கப்படுவதைக் காணலாம், மேலும் அழுத்தம் கொடுக்கப்பட்டால், 5500 சிபி வரை பாகுத்தன்மை கொண்ட திரவங்கள் கூட அருகிலுள்ள அறைக்கு மாற்றப்படலாம், இதனால் அதிக மாதிரிகளைக் கண்டறிய முடியும். பாகுத்தன்மை (அதாவது ஸ்பூட்டம், சுவாச நோய்களைக் கண்டறிவதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் மிகவும் பிசுபிசுப்பான மாதிரி).
மேலே உள்ள மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் டிஸ்பென்சிங் சாதனங்களை இணைப்பதன் மூலம், பரந்த அளவிலான ஃபாஸ்ட் அடிப்படையிலான POCT சாதனங்களை உருவாக்க முடியும்.ஒரு உதாரணம் படம் 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது. ஆலையில் ஒரு முன் சேமிப்பு அறை, ஒரு கலவை அறை, ஒரு எதிர்வினை அறை மற்றும் ஒரு கழிவு அறை உள்ளது.வினைப்பொருட்கள் நீண்ட காலத்திற்கு முன்-சேமிப்பு அறையில் சேமிக்கப்பட்டு பின்னர் கலவை அறைக்குள் வெளியேற்றப்படலாம்.சரியான அழுத்தத்துடன், கலப்பு எதிர்வினைகள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட முறையில் கழிவு அறை அல்லது எதிர்வினை அறைக்கு மாற்றப்படலாம்.
PCR கண்டறிதல் என்பது H1N1 மற்றும் கோவிட்-19 போன்ற நோய்க்கிருமிகளைக் கண்டறிவதற்கான தங்கத் தரமாக இருப்பதால், மேலும் பல எதிர்வினைப் படிகளை உள்ளடக்கியதால், PCR கண்டறிதலுக்கான FAST-POCT தளத்தை ஒரு பயன்பாடாகப் பயன்படுத்தினோம்.அத்திப்பழத்தில்.4 FAST-POCT இயங்குதளத்தைப் பயன்படுத்தி PCR சோதனை செயல்முறையைக் காட்டுகிறது.முதலில், eluting reagent, magnetic microbead reagent, wash solution A, மற்றும் wash solution W ஆகியவை முறையே முன்-சேமிப்பு அறைகளான E, M, W1 மற்றும் W2 ஆகியவற்றில் குழாய் மூலம் செலுத்தப்பட்டன.ஆர்என்ஏ உறிஞ்சுதலின் நிலைகள் அத்தியில் காட்டப்பட்டுள்ளன.4a மற்றும் பின்வருபவை: (1) அழுத்தம் P1 (=0.26 பார்) பயன்படுத்தப்படும் போது, ​​மாதிரி M அறைக்குள் நகர்கிறது மற்றும் கலவை அறைக்குள் வெளியேற்றப்படுகிறது.(2) காற்று அழுத்தம் P2 (= 0.12 பார்) கலவை அறையின் அடிப்பகுதியில் இணைக்கப்பட்ட போர்ட் A மூலம் வழங்கப்படுகிறது.பல கலவை முறைகள் POCT இயங்குதளங்களில் (எ.கா. பாம்பு கலவை 53, சீரற்ற கலவை 54 மற்றும் தொகுதி கலவை 55) திரவங்களை கலப்பதில் தங்கள் திறனை வெளிப்படுத்தியிருந்தாலும், அவற்றின் கலவை திறன் மற்றும் செயல்திறன் இன்னும் திருப்திகரமாக இல்லை.இது குமிழி கலவை முறையைப் பின்பற்றுகிறது, இதில் திரவத்தில் குமிழ்களை உருவாக்க கலவை அறையின் அடிப்பகுதியில் காற்று அறிமுகப்படுத்தப்படுகிறது, அதன் பிறகு சக்திவாய்ந்த சுழல் நொடிகளில் முழுமையான கலவையை அடைய முடியும்.குமிழி கலவை சோதனைகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன மற்றும் முடிவுகள் துணை படம் S6 இல் வழங்கப்பட்டுள்ளன.0.10 பட்டையின் அழுத்தத்தைப் பயன்படுத்தும்போது, ​​முழுமையான கலவையானது சுமார் 8 வினாடிகள் ஆகும் என்பதைக் காணலாம்.அழுத்தத்தை 0.20 பட்டியாக அதிகரிப்பதன் மூலம், முழுமையான கலவை சுமார் 2 வினாடிகளில் அடையப்படுகிறது.கலவை செயல்திறனைக் கணக்கிடுவதற்கான முறைகள் முறைகள் பிரிவில் வழங்கப்பட்டுள்ளன.(3) மணிகளைப் பிரித்தெடுக்க ரூபிடியம் காந்தத்தைப் பயன்படுத்தவும், பின்னர் P3 (= 0.17 பார்) போர்ட் P மூலம் அழுத்தி கழிவு அறைக்குள் வினைகளை நகர்த்தவும்.அத்திப்பழத்தில்.4b,c மாதிரியில் இருந்து அசுத்தங்களை அகற்றுவதற்கான சலவை படிகளை பின்வருமாறு காட்டுகிறது: (1) அறை W1 இலிருந்து A சலவை தீர்வு அழுத்தம் கலவை அறை P1 இல் வெளியேற்றப்படுகிறது.(2) பின்னர் குமிழி கலவை செயல்முறை செய்யவும்.(3) கழுவும் கரைசல் A கழிவு திரவ அறைக்கு மாற்றப்படுகிறது, மேலும் கலவை அறையில் உள்ள நுண்மணிகள் காந்தத்தால் வெளியே இழுக்கப்படுகின்றன.W (படம் 4c) கழுவுதல் A (படம் 4b) போன்றது.ஒவ்வொரு சலவை படியும் A மற்றும் W இரண்டு முறை செய்யப்பட்டது என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.படம் 4d, மணிகளில் இருந்து ஆர்.என்.ஏ.வை நீக்குவதற்கான எலுஷன் படிகளைக் காட்டுகிறது;நீக்குதல் மற்றும் கலவை அறிமுகம் படிகள் மேலே விவரிக்கப்பட்ட ஆர்என்ஏ உறிஞ்சுதல் மற்றும் கழுவுதல் படிகள் போலவே இருக்கும்.பி3 மற்றும் பி4 (=0.23 பார்) அழுத்தங்களின் கீழ் பிசிஆர் எதிர்வினை அறைக்குள் எலுஷன் ரியாஜெண்டுகள் மாற்றப்படுவதால், பிசிஆர் எதிர்வினை அறையின் கையை மூடுவதற்கு முக்கியமான அழுத்தம் அடையப்படுகிறது.இதேபோல், P4 அழுத்தம் கழிவு அறைக்கு செல்லும் பாதையை மூடவும் உதவுகிறது.இவ்வாறு, மல்டிபிளக்ஸ் பிசிஆர் எதிர்வினைகளைத் தொடங்க நான்கு பிசிஆர் எதிர்வினை அறைகளில் அனைத்து எலுஷன் ரியாஜெண்டுகளும் சமமாக விநியோகிக்கப்பட்டன.மேலே உள்ள செயல்முறை துணை மூவி S6 இல் வழங்கப்படுகிறது.
ஆர்என்ஏ உறிஞ்சுதல் படியில், மாதிரியானது நுழைவாயில் M இல் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டு, முன்பு சேமிக்கப்பட்ட பீட் கரைசலுடன் கலவை அறைக்குள் செலுத்தப்படுகிறது.துகள்களை கலந்து அகற்றிய பிறகு, வினைப்பொருட்கள் கழிவு அறைக்குள் விநியோகிக்கப்படுகின்றன.b மற்றும் c கழுவும் படிகள், பல்வேறு முன்-சேமிக்கப்பட்ட வாஷ் ரியாஜெண்டுகளை கலவை அறைக்குள் அறிமுகப்படுத்தவும், மற்றும் மணிகளை கலந்து நீக்கிய பின், வினைப்பொருட்களை கழிவு திரவ அறைக்கு மாற்றவும்.d எலுஷன் படி: எலுஷன் ரியாஜெண்டுகளை அறிமுகப்படுத்திய பிறகு, கலவை மற்றும் பீட் பிரித்தெடுத்தல், எதிர்வினைகள் PCR எதிர்வினை அறைக்கு மாற்றப்படும்.வளைவுகள் பல்வேறு நிலைகளின் பணிப்பாய்வு மற்றும் தொடர்புடைய அளவுருக்களைக் காட்டுகின்றன.அழுத்தம் என்பது தனிப்பட்ட அறைகள் மூலம் செலுத்தப்படும் அழுத்தம்.தொகுதி என்பது கலவை அறையில் உள்ள திரவத்தின் அளவு.அனைத்து அளவிலான பார்கள் 1 செ.மீ.மூல தரவு மூல தரவு கோப்புகளாக வழங்கப்படுகிறது.
ஒரு PCR சோதனை செயல்முறை செய்யப்பட்டது மற்றும் துணை படம் S7 20 நிமிட தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் நேரம் மற்றும் 60 நிமிட வெப்ப சைக்கிள் ஓட்டுதல் நேரம் (95 மற்றும் 60 °C) உள்ளிட்ட வெப்ப சுயவிவரங்களை வழங்குகிறது, ஒரு வெப்ப சுழற்சி 90 வி (துணை மூவி S7) ஆகும்..FAST-POCT ஆனது வழக்கமான RT-PCR (ஒரு வெப்ப சுழற்சிக்கு 180 வினாடிகள்) விட ஒரு வெப்ப சுழற்சியை (90 வினாடிகள்) முடிக்க குறைந்த நேரம் தேவைப்படுகிறது.அதிக பரப்பளவு மற்றும் தொகுதி விகிதம் மற்றும் மைக்ரோ-பிசிஆர் எதிர்வினை அறையின் குறைந்த வெப்ப நிலைத்தன்மை ஆகியவற்றால் இதை விளக்கலாம்.அறையின் மேற்பரப்பு 96.6 மிமீ2 மற்றும் அறையின் அளவு 25 மிமீ3 ஆகும், இதனால் மேற்பரப்பு மற்றும் தொகுதி விகிதம் தோராயமாக 3.86 ஆகும்.துணைப் படம் S10 இல் காணப்படுவது போல், எங்கள் தளத்தின் PCR சோதனைப் பகுதியில் பின் பேனலில் ஒரு பள்ளம் உள்ளது, இது PCR அறையின் அடிப்பகுதி 200 µm தடிமனாக இருக்கும்.வெப்பநிலை கட்டுப்படுத்தியின் வெப்பமூட்டும் மேற்பரப்பில் வெப்ப கடத்தும் மீள் திண்டு இணைக்கப்பட்டுள்ளது, இது சோதனை பெட்டியின் பின்புறத்துடன் இறுக்கமான தொடர்பை உறுதி செய்கிறது.இது மேடையின் வெப்ப நிலைத்தன்மையைக் குறைக்கிறது மற்றும் வெப்பமூட்டும் / குளிரூட்டும் செயல்திறனை மேம்படுத்துகிறது.வெப்ப சுழற்சியின் போது, ​​பிளாட்ஃபார்மில் பதிக்கப்பட்ட பாரஃபின் உருகி PCR எதிர்வினை அறைக்குள் பாய்கிறது, வினையாக்கி ஆவியாதல் மற்றும் சுற்றுச்சூழல் மாசுபாட்டைத் தடுக்க முத்திரை குத்த பயன்படும் மெழுகு போன்ற ஒரு பொருளாக செயல்படுகிறது (துணைத் திரைப்படம் S8 ஐப் பார்க்கவும்).
மேலே விவரிக்கப்பட்ட அனைத்து PCR கண்டறிதல் செயல்முறைகளும் தனிப்பயனாக்கப்பட்ட வேகமான POCT கருவியைப் பயன்படுத்தி முழுமையாக தானியக்கமாக்கப்பட்டன, இதில் திட்டமிடப்பட்ட அழுத்தக் கட்டுப்பாட்டு அலகு, ஒரு காந்தப் பிரித்தெடுத்தல் அலகு, ஒரு வெப்பநிலை கட்டுப்பாட்டு அலகு மற்றும் ஒரு ஒளிரும் சமிக்ஞை பிடிப்பு மற்றும் செயலாக்க அலகு ஆகியவை அடங்கும்.குறிப்பு, நாங்கள் RNA தனிமைப்படுத்த FAST-POCT இயங்குதளத்தைப் பயன்படுத்தினோம், பின்னர் FAST-POCT அமைப்பு மற்றும் டெஸ்க்டாப் PCR அமைப்பைப் பயன்படுத்தி PCR எதிர்வினைகளுக்கு பிரித்தெடுக்கப்பட்ட RNA மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தினோம்.துணை படம் S8 இல் காட்டப்பட்டுள்ளதைப் போலவே முடிவுகள் கிட்டத்தட்ட ஒரே மாதிரியாக இருந்தன.ஆபரேட்டர் ஒரு எளிய பணியைச் செய்கிறார்: மாதிரியை எம்-அறைக்குள் அறிமுகப்படுத்துகிறது மற்றும் கருவியில் மேடையை செருகுகிறது.அளவு சோதனை முடிவுகள் சுமார் 82 நிமிடங்களில் கிடைக்கும்.FAST-POCT கருவிகள் பற்றிய விரிவான தகவல்களை துணை படத்தில் காணலாம்.C9, C10 மற்றும் C11.
இன்ஃப்ளூயன்ஸா ஏ (ஐஏவி), பி (ஐபிவி), சி (ஐசிவி) மற்றும் டி (ஐடிவி) வைரஸ்களால் ஏற்படும் காய்ச்சல் ஒரு பொதுவான உலகளாவிய நிகழ்வு ஆகும்.இவற்றில், IAV மற்றும் IBV ஆகியவை உலக மக்கள்தொகையில் 5-15% மக்களைப் பாதித்து, 3-5 மில்லியன் கடுமையான நோய்களை ஏற்படுத்துகிறது மற்றும் ஆண்டுதோறும் 290,000-650,000 இறப்புகளை ஏற்படுத்துகிறது.சுவாச நோய்கள்56,57.நோயுற்ற தன்மை மற்றும் அதனுடன் தொடர்புடைய பொருளாதாரச் சுமையைக் குறைக்க IAV மற்றும் IB இன் ஆரம்பகால கண்டறிதல் அவசியம்.கிடைக்கக்கூடிய கண்டறியும் நுட்பங்களில், தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (RT-PCR) மிகவும் உணர்திறன், குறிப்பிட்ட மற்றும் துல்லியமானதாகக் கருதப்படுகிறது (>99%)58,59.கிடைக்கக்கூடிய கண்டறியும் நுட்பங்களில், தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (RT-PCR) மிகவும் உணர்திறன், குறிப்பிட்ட மற்றும் துல்லியமானதாகக் கருதப்படுகிறது (>99%)58,59.ஸ்ரேடி டஸ்டூப்னிக்ஸ் டயக்னோஸ்டிக் மெடோவ் பாலிமெரஸ்னா டெக்னாயா ரெக்ஷியா எஸ் ஆப்ராட்னாய் டிரான்ஸ்க்ரிப்டசோய் ее чувствительной, специфичной மற்றும் точной (> 99%)58,59.கிடைக்கக்கூடிய கண்டறியும் முறைகளில், தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (RT-PCR) மிகவும் உணர்திறன், குறிப்பிட்ட மற்றும் துல்லியமானதாகக் கருதப்படுகிறது (> 99%)58,59. Из доступных дагностических полимеразная цепная ракция с обратной TRANSKRIPTAZOY CHувствительной, специфичной மற்றும் точной (>99%)58,59.கிடைக்கக்கூடிய கண்டறியும் முறைகளில், தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (RT-PCR) மிகவும் உணர்திறன், குறிப்பிட்ட மற்றும் துல்லியமானதாகக் கருதப்படுகிறது (>99%)58,59.இருப்பினும், பாரம்பரிய RT-PCR முறைகளுக்கு மீண்டும் மீண்டும் குழாய், கலவை, விநியோகம் மற்றும் திரவத்தை மாற்றுதல், வள-வரையறுக்கப்பட்ட அமைப்புகளில் வல்லுநர்களால் அவற்றின் பயன்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்துதல் ஆகியவை தேவைப்படுகின்றன.இங்கே, FAST-POCT இயங்குதளம் முறையே IAV மற்றும் IBV ஆகியவற்றின் PCR கண்டறிதலுக்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது, அவற்றின் குறைந்த வரம்பு கண்டறிதலை (LOD) பெறுகிறது.கூடுதலாக, IAV மற்றும் IBV ஆகியவை இனங்கள் முழுவதும் வெவ்வேறு நோய்க்குறிகளுக்கு இடையில் பாகுபாடு காட்ட மல்டிப்ளெக்ஸ் செய்யப்பட்டுள்ளன, இது மரபணு பகுப்பாய்வு மற்றும் நோய்க்கு துல்லியமாக சிகிச்சையளிப்பதற்கான ஒரு நம்பிக்கைக்குரிய தளத்தை வழங்குகிறது.
அத்திப்பழத்தில்.5a 150 µl சுத்திகரிக்கப்பட்ட வைரஸ் RNA ஐ மாதிரியாகப் பயன்படுத்தி HAV PCR சோதனையின் முடிவுகளைக் காட்டுகிறது.அத்திப்பழத்தில்.5a(i) 106 பிரதிகள்/ml என்ற HAV செறிவில், ஃப்ளோரசன்ஸ் செறிவு (ΔRn) 0.830 ஐ அடையலாம், மேலும் செறிவு 102 பிரதிகள்/ml ஆகக் குறைக்கப்படும்போது, ​​ΔRn இன்னும் 0.365 ஐ அடையலாம், இது அதை விட அதிகமாக இருக்கும். வெற்று எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டு குழுவின் (0.002), சுமார் 100 மடங்கு அதிகம்.ஆறு சுயாதீன சோதனைகளின் அடிப்படையில் அளவீடு செய்ய, 102-106 பிரதிகள்/mL வரையிலான IAV (படம். 5a(ii)), R2 = 0.993 இன் பதிவு செறிவு மற்றும் சுழற்சி வாசல் (Ct) இடையே ஒரு நேரியல் அளவுத்திருத்த வளைவு உருவாக்கப்பட்டது.முடிவுகள் வழக்கமான RT-PCR முறைகளுடன் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளன.அத்திப்பழத்தில்.5a(iii) FAST-POCT இயங்குதளத்தின் 40 சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு சோதனை முடிவுகளின் ஒளிரும் படங்களைக் காட்டுகிறது.FAST-POCT இயங்குதளம் 102 பிரதிகள்/mL வரை HAV ஐக் கண்டறிய முடியும் என்பதைக் கண்டறிந்தோம்.இருப்பினும், பாரம்பரிய முறையானது 102 பிரதிகள்/mL இல் Ct மதிப்பைக் கொண்டிருக்கவில்லை, இது சுமார் 103 பிரதிகள்/mL என்ற LOD ஆக இருக்கும்.குமிழி கலவையின் உயர் செயல்திறன் காரணமாக இது இருக்கலாம் என்று நாங்கள் அனுமானித்தோம்.குலுக்கல் கலவை (வழக்கமான RT-PCR செயல்பாட்டில் உள்ள அதே கலவை முறை), குப்பி கலவை (இந்த முறை, 0.12 பட்டியில் 3 வினாடிகள்) மற்றும் ஒரு கட்டுப்பாட்டு குழுவாக கலக்காதது உட்பட பல்வேறு கலவை முறைகளை மதிப்பிடுவதற்கு PCR சோதனை சோதனைகள் சுத்திகரிக்கப்பட்ட IAV RNA இல் மேற்கொள்ளப்பட்டன. ..முடிவுகளை துணை படம் S12 இல் காணலாம்.அதிக RNA செறிவில் (106 பிரதிகள்/mL), வெவ்வேறு கலவை முறைகளின் Ct மதிப்புகள் குமிழி கலவையைப் போலவே இருக்கும்.RNA செறிவு 102 பிரதிகள்/mL ஆகக் குறைந்தபோது, ​​குலுக்கல் கலவை மற்றும் கட்டுப்பாடுகள் Ct மதிப்புகளைக் கொண்டிருக்கவில்லை, அதே சமயம் குமிழி கலவை முறையானது Ct மதிப்பு 36.9 ஐக் கொடுத்தது, இது 38 இன் Ct வாசலுக்குக் கீழே இருந்தது. முடிவுகள் ஆதிக்கம் செலுத்தும் கலவைப் பண்புகளைக் காட்டுகின்றன. வெசிகல்ஸ், இது மற்ற இலக்கியங்களிலும் நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது, இது FAST-POCT இயங்குதளத்தின் உணர்திறன் ஏன் வழக்கமான RT-PCR ஐ விட சற்று அதிகமாக உள்ளது என்பதையும் விளக்கலாம்.அத்திப்பழத்தில்.101 முதல் 106 பிரதிகள்/மில்லி வரை சுத்திகரிக்கப்பட்ட IBV RNA மாதிரிகளின் PCR பகுப்பாய்வு முடிவுகளை 5b காட்டுகிறது.முடிவுகள் IAV சோதனையைப் போலவே இருந்தன, R2 = 0.994 மற்றும் LOD 102 பிரதிகள்/mL ஐ அடைந்தன.
106 முதல் 101 பிரதிகள்/mL வரையிலான IAV செறிவுகள் கொண்ட இன்ஃப்ளூயன்ஸா A வைரஸ் (IAV) இன் PCR பகுப்பாய்வு, TE இடையகத்தை எதிர்மறைக் கட்டுப்பாட்டாக (NC) பயன்படுத்துகிறது.(i) நிகழ் நேர ஒளிர்வு வளைவு.(ii) வேகமான மற்றும் வழக்கமான சோதனை முறைகளுக்கான மடக்கை ஐஏவி ஆர்என்ஏ செறிவு மற்றும் சுழற்சி வாசல் (சிடி) இடையே நேரியல் அளவுத்திருத்த வளைவு.(iii) 40 சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு IAV FAST-POCT ஃப்ளோரசன்ட் படம்.b, (i) நிகழ்நேர ஃப்ளோரசன்ஸ் ஸ்பெக்ட்ரம் மூலம் இன்ஃப்ளூயன்ஸா பி வைரஸின் (IBV) PCR கண்டறிதல்.(ii) நேரியல் அளவுத்திருத்த வளைவு மற்றும் (iii) 40 சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு வேகமான-POCT IBV ஃப்ளோரசன்ஸ் படம்.FAST-POCT இயங்குதளத்தைப் பயன்படுத்தி IAV மற்றும் IBVக்கான கண்டறிதலின் குறைந்த வரம்பு (LOD) 102 பிரதிகள்/mL ஆகும், இது வழக்கமான முறைகளை விட (103 பிரதிகள்/mL) குறைவாக உள்ளது.c IAV மற்றும் IBVக்கான மல்டிபிளக்ஸ் சோதனை முடிவுகள்.GAPDH நேர்மறைக் கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் சாத்தியமான மாசுபாடு மற்றும் பின்னணி பெருக்கத்தைத் தடுக்க TE இடையக எதிர்மறைக் கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது.நான்கு வெவ்வேறு மாதிரி வகைகளை வேறுபடுத்தி அறியலாம்: (1) GAPDH-மட்டும் எதிர்மறை மாதிரிகள் ("IAV-/IBV-");(2) IAV மற்றும் GAPDH உடன் IAV தொற்று ("IAV+/IBV-");(3) IBV மற்றும் GAPDH உடன் IBV தொற்று ("IAV-/IBV+");(4) IAV, IBV மற்றும் GAPDH உடன் IAV/IBV தொற்று (“IAV+/IBV+”).புள்ளியிடப்பட்ட கோடு வாசலைக் குறிக்கிறது.n = 6 உயிரியல் ரீதியாக சுயாதீன சோதனைகள் செய்யப்பட்டன, தரவு ± நிலையான விலகலாகக் காட்டப்படுகிறது.மூல தரவு மூல தரவு கோப்புகளாக வழங்கப்படுகிறது.
அத்திப்பழத்தில்.5c IAV/IBVக்கான மல்டிபிளக்சிங் சோதனையின் முடிவுகளைக் காட்டுகிறது.இங்கே, சுத்திகரிக்கப்பட்ட RNA க்கு பதிலாக வைரஸ் லைசேட் ஒரு மாதிரி தீர்வாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் IAV, IBV, GAPDH (நேர்மறை கட்டுப்பாடு) மற்றும் TE பஃபர் (எதிர்மறை கட்டுப்பாடு) ஆகியவற்றிற்கான நான்கு ப்ரைமர்கள் FAST-POCT இயங்குதளத்தின் நான்கு வெவ்வேறு எதிர்வினை அறைகளில் சேர்க்கப்பட்டன.சாத்தியமான மாசுபாடு மற்றும் பின்னணி மேம்பாட்டைத் தடுக்க நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாடுகள் இங்கே பயன்படுத்தப்படுகின்றன.சோதனைகள் நான்கு குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன: (1) GAPDH-எதிர்மறை மாதிரிகள் ("IAV-/IBV-");(2) IAV-பாதிக்கப்பட்ட (“IAV+/IBV-”) எதிராக IAV மற்றும் GAPDH;(3) IBV-.பாதிக்கப்பட்ட (“IAV-”) -/IBV+”) IBV மற்றும் GAPDH;(4) IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) IAV, IBV மற்றும் GAPDH உடன் தொற்று.அத்திப்பழத்தில்.எதிர்மறை மாதிரிகள் பயன்படுத்தப்படும் போது, ​​நேர்மறை கட்டுப்பாட்டு அறையின் ஒளிரும் தீவிரம் ΔRn 0.860 ஆகவும், IAV மற்றும் IBV இன் ΔRn எதிர்மறையான கட்டுப்பாட்டை (0.002) ஒத்ததாகவும் 5c காட்டுகிறது.IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ மற்றும் IAV+/IBV+ குழுக்களுக்கு, IAV/GAPDH, IBV/GAPDH மற்றும் IAV/IBV/GAPDH கேமராக்கள் முறையே குறிப்பிடத்தக்க ஃப்ளோரசன் செறிவைக் காட்டியது, மற்ற கேமராக்கள் பின்புலத் தீவிரத்தில் கூட ஒளிர்வுத் தீவிரத்தைக் காட்டியது. வெப்ப சுழற்சிக்குப் பிறகு 40 நிலை.மேலே உள்ள சோதனைகளில் இருந்து, FAST-POCT இயங்குதளம் சிறப்பான தனித்துவத்தைக் காட்டியது மற்றும் வெவ்வேறு இன்ஃப்ளூயன்ஸா வைரஸ்களை ஒரே நேரத்தில் பாத்தோடைப் செய்ய அனுமதித்தது.
FAST-POCT இன் மருத்துவப் பொருந்தக்கூடிய தன்மையை சரிபார்க்க, IB நோயாளிகளிடமிருந்து (n=18) மற்றும் IB அல்லாத கட்டுப்பாடுகள் (n=18) (படம் 6a) ஆகியோரிடமிருந்து 36 மருத்துவ மாதிரிகள் (மூக்கு துடைப்பான் மாதிரிகள்) சோதனை செய்தோம்.நோயாளியின் தகவல் துணை அட்டவணை 3 இல் வழங்கப்பட்டுள்ளது. IB தொற்று நிலை சுயாதீனமாக உறுதிப்படுத்தப்பட்டது மற்றும் ஆய்வு நெறிமுறை Zhejiang பல்கலைக்கழக முதல் இணைந்த மருத்துவமனையால் (Hangzhou, Zhejiang) அங்கீகரிக்கப்பட்டது.நோயாளிகளின் ஒவ்வொரு மாதிரியும் இரண்டு வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டது.ஒன்று FAST-POCT ஐப் பயன்படுத்தி செயலாக்கப்பட்டது, மற்றொன்று டெஸ்க்டாப் PCR அமைப்பைப் பயன்படுத்தி செயலாக்கப்பட்டது (SLAN-96P, சீனா).இரண்டு மதிப்பீடுகளும் ஒரே சுத்திகரிப்பு மற்றும் கண்டறிதல் கருவிகளைப் பயன்படுத்துகின்றன.அத்திப்பழத்தில்.6b FAST-POCT மற்றும் வழக்கமான தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் PCR (RT-PCR) முடிவுகளைக் காட்டுகிறது.ஃப்ளோரசன்ஸ் தீவிரத்தை (FAST-POCT) -log2(Ct) உடன் ஒப்பிட்டோம், இங்கு Ct என்பது வழக்கமான RT-PCRக்கான சுழற்சி வரம்பு ஆகும்.இரண்டு முறைகளுக்கும் இடையே நல்ல உடன்பாடு இருந்தது.FAST-POCT மற்றும் RT-PCR ஆகியவை பியர்சனின் விகிதம் (r) மதிப்பு 0.90 உடன் வலுவான நேர்மறை தொடர்பைக் காட்டின (படம் 6b).FAST-POCT இன் கண்டறியும் துல்லியத்தை நாங்கள் மதிப்பீடு செய்தோம்.நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை மாதிரிகளுக்கான ஃப்ளோரசன்ஸ் தீவிரம் (FL) விநியோகங்கள் ஒரு சுயாதீனமான பகுப்பாய்வு நடவடிக்கையாக வழங்கப்பட்டன (படம் 6c).FL மதிப்புகள் IB நோயாளிகளில் கட்டுப்பாடுகளை விட கணிசமாக அதிகமாக இருந்தது (****P = 3.31 × 10-19; two-tailed t-test) (Fig. 6d).அடுத்து, IBV ரிசீவர் இயக்க பண்புகள் (ROC) வளைவுகள் திட்டமிடப்பட்டன.1 (படம் 6e) வளைவின் கீழ் ஒரு பகுதியுடன், கண்டறியும் துல்லியம் மிகவும் நன்றாக இருப்பதைக் கண்டறிந்தோம்.2020 ஆம் ஆண்டு நிலவரப்படி கோவிட்-19 காரணமாக சீனாவில் கட்டாய முகமூடி ஆர்டர் செய்யப்படுவதால், IBD நோயாளிகளை நாங்கள் அடையாளம் காணவில்லை, எனவே அனைத்து நேர்மறை மருத்துவ மாதிரிகள் (அதாவது, நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள்) IBV க்கு மட்டுமே.
மருத்துவ ஆய்வு வடிவமைப்பு.18 நோயாளி மாதிரிகள் மற்றும் 18 காய்ச்சல் அல்லாத கட்டுப்பாடுகள் உட்பட மொத்தம் 36 மாதிரிகள் FAST-POCT இயங்குதளம் மற்றும் வழக்கமான RT-PCR ஐப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.b FAST-POCT PCR மற்றும் வழக்கமான RT-PCR ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான பகுப்பாய்வு நிலைத்தன்மையை மதிப்பிடுக.முடிவுகள் நேர்மறையாக தொடர்புடையவை (பியர்சன் ஆர் = 0.90).c 18 IB நோயாளிகள் மற்றும் 18 கட்டுப்பாடுகளில் ஃப்ளோரசன்ஸின் தீவிர நிலைகள்.d IB நோயாளிகளில் (+), FL மதிப்புகள் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவை விட (-) (**P = 3.31 × 10-19; டூ-டெயில் டி-டெஸ்ட்; n = 36) விட அதிகமாக இருந்தது.ஒவ்வொரு சதுர அடுக்குக்கும், மையத்தில் உள்ள கருப்பு மார்க்கர் இடைநிலையைக் குறிக்கிறது, மேலும் பெட்டியின் கீழ் மற்றும் மேல் கோடுகள் முறையே 25வது மற்றும் 75வது சதவிகிதத்தைக் குறிக்கும்.விஸ்கர்கள் குறைந்தபட்ச மற்றும் அதிகபட்ச தரவு புள்ளிகளுக்கு நீட்டிக்கப்படுகின்றன, அவை வெளிப்புறமாக கருதப்படவில்லை.e ROC வளைவு.புள்ளியிடப்பட்ட கோடு d என்பது ROC பகுப்பாய்விலிருந்து மதிப்பிடப்பட்ட வரம்பு மதிப்பைக் குறிக்கிறது.IBVக்கான AUC என்பது 1. மூல தரவு மூல தரவு கோப்புகளாக வழங்கப்படுகிறது.
இந்த கட்டுரையில், நாங்கள் FAST ஐ வழங்குகிறோம், இது ஒரு சிறந்த POCT க்கு தேவையான பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது.எங்கள் தொழில்நுட்பத்தின் நன்மைகள் பின்வருவனவற்றை உள்ளடக்குகின்றன: (1) பல்துறை அளவு (அடுக்கு, ஒரே நேரத்தில், தொடர் மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட), தேவைக்கேற்ப வெளியீடு (பயன்படுத்தப்பட்ட அழுத்தத்தின் விரைவான மற்றும் விகிதாசார வெளியீடு) மற்றும் நம்பகமான செயல்பாடு (150 டிகிரியில் அதிர்வு) (2) நீண்ட கால சேமிப்பு (2 ஆண்டுகள் துரிதப்படுத்தப்பட்ட சோதனை, எடை இழப்பு சுமார் 0.3%);(3) ஈரப்பதம் மற்றும் பாகுத்தன்மை (5500 சிபி வரை பாகுத்தன்மை) கொண்ட திரவங்களுடன் வேலை செய்யும் திறன்;(4) பொருளாதாரம் (FAST-POCT PCR சாதனத்தின் மதிப்பிடப்பட்ட பொருள் செலவு தோராயமாக US$1 ஆகும்).மல்டிஃபங்க்ஸ்னல் டிஸ்பென்சர்களை இணைப்பதன் மூலம், இன்ஃப்ளூயன்ஸா ஏ மற்றும் பி வைரஸ்களை PCR கண்டறிவதற்கான ஒருங்கிணைந்த ஃபாஸ்ட்-POCT இயங்குதளம் நிரூபிக்கப்பட்டு பயன்படுத்தப்பட்டது.FAST-POCT 82 நிமிடங்கள் மட்டுமே எடுக்கும்.36 நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள் கொண்ட மருத்துவ சோதனைகள் நிலையான RT-PCR (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஒளிரும் தீவிரத்தில் நல்ல ஒத்திசைவைக் காட்டின.36 நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள் கொண்ட மருத்துவ சோதனைகள் நிலையான RT-PCR (பியர்சன் குணகங்கள் > 0.9) உடன் ஒளிரும் தீவிரத்தில் நல்ல ஒத்திசைவைக் காட்டின.கிளீனிசெஸ்கி டெஸ்டிஸ் 36 ஆபிராமி மாஸ்கோவ் மற்றும் நோசா போகசலி ஹாரோஷியா சமூகவியல் й ОТ-ПЦР (கோஃபிஃபிஷ்யண்ட்டி பிர்சோனா > 0,9).நாசி ஸ்வாப்களின் 36 மாதிரிகள் கொண்ட மருத்துவ சோதனைகள் நிலையான RT-PCR இன் ஒளிரும் தீவிரத்துடன் நல்ல உடன்பாட்டைக் காட்டியது (பியர்சனின் குணகங்கள் > 0.9).RT-PCR க்ளினிசெஸ்கி இஸ்பிட்டனியா 36 ஒப்ராசியோவ் மாஸ்கோவ் மற்றும் நோசா பொகசலி ஹாரோஷியே சவ்படெனிஸ் இன்டர்நெட் இன்ஸ்டிடியூஷன் NOY ОТ-ПЦР (கோஃபிஃபிஷ்யண்ட் பிர்சோனா > 0,9).36 நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகளின் மருத்துவப் பரிசோதனையானது நிலையான RT-PCR (பியர்சனின் குணகம்> 0.9) உடன் ஃப்ளோரசன்ஸ் தீவிரத்தின் நல்ல உடன்பாட்டைக் காட்டியது.இந்த வேலைக்கு இணையாக, பல்வேறு வளர்ந்து வரும் உயிர்வேதியியல் முறைகள் (எ.கா., பிளாஸ்மா வெப்ப சைக்கிள் ஓட்டுதல், பெருக்கம் இல்லாத நோயெதிர்ப்பு ஆய்வுகள் மற்றும் நானோபாடி செயல்பாட்டு மதிப்பீடுகள்) POCT இல் அவற்றின் திறனைக் காட்டியுள்ளன.இருப்பினும், முழுமையாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட மற்றும் வலுவான POCT இயங்குதளம் இல்லாததால், இந்த முறைகளுக்குத் தவிர்க்க முடியாமல் தனித்தனியான முன் செயலாக்க நடைமுறைகள் (எ.கா., RNA தனிமைப்படுத்துதல், அடைகாத்தல்45 மற்றும் கழுவுதல் 46) தேவைப்படுகின்றன. தேவையான அளவுருக்கள்.பதில்-வெளியீட்டு செயல்திறன் பெறுதல்.இந்த வேலையில், ஃபாஸ்ட் வால்வைச் செயல்படுத்தப் பயன்படுத்தப்படும் ஏர் பம்ப், பெஞ்ச்டாப் கருவியில் (படம். எஸ்9, எஸ்10) ஒருங்கிணைக்கும் அளவுக்கு சிறியதாக இருந்தாலும், அது இன்னும் குறிப்பிடத்தக்க சக்தியைப் பயன்படுத்துகிறது மற்றும் சத்தத்தை உருவாக்குகிறது.கொள்கையளவில், சிறிய ஃபார்ம் ஃபேக்டர் நியூமேடிக் பம்புகளை மின்காந்த விசை அல்லது விரல் இயக்கம் போன்ற பிற வழிகளால் மாற்றலாம்.மேலும் மேம்பாடுகளில், எடுத்துக்காட்டாக, வெவ்வேறு மற்றும் குறிப்பிட்ட உயிர்வேதியியல் மதிப்பீடுகளுக்கான கருவிகளை மாற்றியமைத்தல், வெப்பமூட்டும்/குளிரூட்டும் அமைப்புகள் தேவையில்லாத புதிய கண்டறிதல் முறைகளைப் பயன்படுத்துதல், இதனால் PCR பயன்பாடுகளுக்கான கருவி இல்லாத POCT தளத்தை வழங்குதல் ஆகியவை அடங்கும்.ஃபாஸ்ட் பிளாட்ஃபார்ம் திரவங்களைக் கையாள ஒரு வழியை வழங்குகிறது என்று நாங்கள் நம்புகிறோம், முன்மொழியப்பட்ட ஃபாஸ்ட் தொழில்நுட்பம் உயிரியல் மருத்துவ சோதனைக்கு மட்டுமல்ல, சுற்றுச்சூழல் கண்காணிப்பு, உணவு தர சோதனை, பொருள் மற்றும் மருந்து தொகுப்பு ஆகியவற்றிற்கும் பொதுவான தளத்தை உருவாக்கும் திறனை வழங்குகிறது என்று நாங்கள் நம்புகிறோம். ..
மனித நாசி சவ்வு மாதிரிகளின் சேகரிப்பு மற்றும் பயன்பாடு Zhejiang பல்கலைக்கழக முதல் இணைந்த மருத்துவமனையின் (IIT20220330B) நெறிமுறைக் குழுவால் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளது.36 நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டன, இதில் 16 பெரியவர்கள் 30 வயதுக்கு மேற்பட்டவர்கள், 7 பெரியவர்கள் > 40 வயதுடையவர்கள் மற்றும் 19 ஆண்கள், 17 பெண்கள்.36 நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டன, இதில் 16 பெரியவர்கள் 30 வயதுக்கு மேற்பட்டவர்கள், 7 பெரியவர்கள் > 40 வயதுடையவர்கள் மற்றும் 19 ஆண்கள், 17 பெண்கள்.பைலோ சோப்ரானோ 36 ஒப்ராசியோவ் மாஸ்கோவ் IS நோசா, в которых prinyali uchastie 16 взрослых < 30 லெட், 7 வது ஷிச்சின் மற்றும் 17 ஜென்ஷின்.30 வயதுக்குட்பட்ட 16 பெரியவர்கள், 40 வயதுக்கு மேற்பட்ட 7 பெரியவர்கள், 19 ஆண்கள் மற்றும் 17 பெண்களிடமிருந்து முப்பத்தாறு நாசி ஸ்வாப் மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டன..மக்கள்தொகை தரவு துணை அட்டவணை 3 இல் வழங்கப்பட்டுள்ளது. அனைத்து பங்கேற்பாளர்களிடமிருந்தும் தகவலறிந்த ஒப்புதல் பெறப்பட்டது.பங்கேற்பாளர்கள் அனைவருக்கும் காய்ச்சல் இருப்பதாக சந்தேகிக்கப்பட்டது மற்றும் இழப்பீடு இல்லாமல் தானாக முன்வந்து சோதனை செய்யப்பட்டது.
ஃபாஸ்ட் பேஸ் மற்றும் மூடி பாலிலாக்டிக் அமிலத்தால் (பிஎல்ஏ) தயாரிக்கப்பட்டு எண்டர் 3 ப்ரோ 3டி பிரிண்டர் (ஷென்ஜென் டிரான்சென்ட் 3டி டெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்) மூலம் அச்சிடப்படுகிறது.அட்ஹெசிவ்ஸ் ரிசர்ச், இன்க். மாடல் 90880 இலிருந்து இரட்டை பக்க டேப் வாங்கப்பட்டது. PET ஃபிலிம் 100 µm தடிமன் McMaster-Carr இலிருந்து வாங்கப்பட்டது.பிசின் மற்றும் PET படம் இரண்டும் Silhouette America, Inc இலிருந்து Silhouette Cameo 2 கட்டரைப் பயன்படுத்தி வெட்டப்பட்டது. மீள் படம் PDMS மெட்டீரியல் ஊசி மூலம் உருவாக்கப்படுகிறது.முதலில், 200 µm தடிமன் கொண்ட PET சட்டகம் லேசர் அமைப்பைப் பயன்படுத்தி வெட்டப்பட்டது மற்றும் 100 µm இரட்டை பக்க பிசின் டேப்பைப் பயன்படுத்தி 3 மிமீ தடிமன் கொண்ட PMMA தாளில் ஒட்டப்பட்டது.PDMS முன்னோடி (சில்கார்ட் 184; பகுதி A: பகுதி B = 10:1, டவ் கார்னிங்) பின்னர் அச்சுக்குள் ஊற்றப்பட்டது மற்றும் அதிகப்படியான PDMS ஐ அகற்ற ஒரு கண்ணாடி கம்பி பயன்படுத்தப்பட்டது.70° C. வெப்பநிலையில் 3 மணி நேரம் குணப்படுத்திய பிறகு, 300 μm தடிமன் கொண்ட PDMS ஃபிலிம் அச்சில் இருந்து உரிக்கப்படலாம்.
பல்துறை விநியோகம், தேவைக்கேற்ப வெளியிடுதல் மற்றும் நம்பகமான செயல்திறன் ஆகியவற்றுக்கான புகைப்படங்கள் அதிவேக கேமரா (Sony AX700 1000 fps) மூலம் எடுக்கப்படுகின்றன.நம்பகத்தன்மை சோதனையில் பயன்படுத்தப்படும் ஆர்பிட்டல் ஷேக்கர் SCILOGEX (SCI-O180) இலிருந்து வாங்கப்பட்டது.காற்றழுத்தம் ஒரு காற்று அமுக்கி மூலம் உருவாக்கப்படுகிறது, மேலும் அழுத்த மதிப்பை சரிசெய்ய பல டிஜிட்டல் துல்லிய அழுத்த கட்டுப்பாட்டாளர்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.ஓட்ட நடத்தை சோதனை செயல்முறை பின்வருமாறு.சோதனைச் சாதனத்தில் முன்னரே தீர்மானிக்கப்பட்ட அளவு திரவம் செலுத்தப்பட்டது மற்றும் ஓட்ட நடத்தையைப் பதிவுசெய்ய அதிவேக கேமரா பயன்படுத்தப்பட்டது.நிலையான நேரங்களில் ஓட்டம் நடத்தையின் வீடியோக்களிலிருந்து நிலையான படங்கள் எடுக்கப்பட்டன, மேலும் மீதமுள்ள பகுதி இமேஜ்-ப்ரோ பிளஸ் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டது, பின்னர் அளவைக் கணக்கிட கேமரா ஆழத்தால் பெருக்கப்பட்டது.ஓட்ட நடத்தை சோதனை முறையின் விவரங்களை துணை படம் S4 இல் காணலாம்.
50 µl மைக்ரோபீட்கள் மற்றும் 100 µl டீயோனைஸ்டு தண்ணீரை குப்பியை கலக்கும் சாதனத்தில் செலுத்தவும்.0.1 பார், 0.15 பார் மற்றும் 0.2 பார் அழுத்தத்தில் ஒவ்வொரு 0.1 வினாடிக்கும் அதிவேக கேமரா மூலம் கலப்பு செயல்திறன் புகைப்படங்கள் எடுக்கப்பட்டன.புகைப்பட செயலாக்க மென்பொருளை (ஃபோட்டோஷாப் CS6) பயன்படுத்தி இந்த படங்களிலிருந்து கலத்தல் செயல்பாட்டின் போது பிக்சல் தகவலைப் பெறலாம்.பின்வரும் சமன்பாடு 53 ஐக் கொண்டு கலவை செயல்திறனை அடையலாம்.
M என்பது கலவை திறன், N என்பது மாதிரி பிக்சல்களின் மொத்த எண்ணிக்கை, மற்றும் ci மற்றும் \(\bar{c}\) ஆகியவை இயல்பாக்கப்பட்ட மற்றும் எதிர்பார்க்கப்படும் இயல்பாக்கப்பட்ட செறிவுகளாகும்.கலவை திறன் 0 (0%, கலக்காதது) முதல் 1 (100%, முழுமையாக கலந்தது) வரை இருக்கும்.முடிவுகள் துணை படம் S6 இல் காட்டப்பட்டுள்ளன.
IAV மற்றும் IBVக்கான நிகழ்நேர RT-PCR கிட், இதில் IAV மற்றும் IBV RNA மாதிரிகள் (பூனை எண். RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, சீனா), Tris-EDTA இடையக (TE இடையக எண். B541019 , சாங்கோன் பயோடெக், சீனா), பாசிட்டிவ் கண்ட்ரோல் ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு கிட் (பகுதி எண். Z-ME-0010, Liferiver, சீனா) மற்றும் GAPDH தீர்வு (பகுதி எண். M591101, சாங்கோன் பயோடெக், சீனா) ஆகியவை வணிக ரீதியாக கிடைக்கின்றன.ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு கருவியில் பிணைப்பு தாங்கல், வாஷ் ஏ, வாஷ் டபிள்யூ, எலுவென்ட், மேக்னடிக் மைக்ரோபீட்ஸ் மற்றும் அக்ரிலிக் கேரியர் ஆகியவை அடங்கும்.IAV மற்றும் IBV நிகழ்நேர RT-PCR கருவிகளில் IFVA நியூக்ளிக் அமிலம் PCR கண்டறிதல் கலவை மற்றும் RT-PCR என்சைம் ஆகியவை அடங்கும்.500 µl பைண்டிங் பஃபர் கரைசலில் 6 µl அக்ரில் கேரியர் மற்றும் 20 µl காந்த மணிகளைச் சேர்த்து, நன்றாக குலுக்கி, பின்னர் பீட் கரைசலை தயார் செய்யவும்.A மற்றும் W ஆகியவற்றைக் கழுவுவதற்கு 21 மில்லி எத்தனாலைச் சேர்த்து, முறையே A மற்றும் W ஆகியவற்றின் தீர்வுகளைப் பெற நன்கு குலுக்கவும்.பின்னர், IFVA நியூக்ளிக் அமிலத்துடன் கூடிய 18 µl ஃப்ளோரசன்ட் PCR கலவையும் 1 µl RT-PCR நொதியும் 1 µl TE கரைசலில் சேர்க்கப்பட்டு, பல வினாடிகளுக்கு அசைக்கப்பட்டு மையவிலக்கு செய்யப்பட்டு, 20 µl IAV மற்றும் IBV ப்ரைமர்களைப் பெற்றன.
பின்வரும் ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு செயல்முறையைப் பின்பற்றவும்: (1) ஆர்என்ஏ உறிஞ்சுதல்.526 µl பெல்லட் கரைசலை 1.5 மில்லி மையவிலக்குக் குழாயில் போட்டு, 150 µl மாதிரியைச் சேர்த்து, பின்னர் குழாயை கைமுறையாக 10 முறை மேலும் கீழும் அசைக்கவும்.676 µl கலவையை அஃபினிட்டி நெடுவரிசைக்கு மாற்றவும் மற்றும் 60 வினாடிகளுக்கு 1.88 x 104 கிராம் மையவிலக்கு.அடுத்தடுத்த வடிகால்களும் அப்புறப்படுத்தப்படுகின்றன.(2) கழுவுதல் முதல் நிலை.அஃபினிட்டி நெடுவரிசையில் 500 µl வாஷ் கரைசல் Aயைச் சேர்க்கவும், 40 வினாடிகளுக்கு 1.88 x 104 கிராம் மையவிலக்கு மற்றும் செலவழித்த கரைசலை நிராகரிக்கவும்.இந்த சலவை செயல்முறை இரண்டு முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது.(3) கழுவுதல் இரண்டாவது நிலை.500 µl வாஷ் கரைசல் W ஐ அஃபினிட்டி நெடுவரிசையில் சேர்க்கவும், 15 வினாடிகளுக்கு 1.88×104 கிராம் மையவிலக்கு மற்றும் செலவழித்த கரைசலை நிராகரிக்கவும்.இந்த சலவை செயல்முறை இரண்டு முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்பட்டது.(4) எலுஷன்.அஃபினிட்டி நெடுவரிசையில் 200 µl எலுவேட்டைச் சேர்த்து, 2 நிமிடத்திற்கு 1.88 x 104 கிராம் மையவிலக்கைச் சேர்க்கவும்.(5) ஆர்டி-பிசிஆர்: பிசிஆர் குழாயில் 20 μl ப்ரைமர் கரைசலில் எலுவேட் செலுத்தப்பட்டது, பின்னர் ஆர்டி-பிசிஆர் செயல்முறையை மேற்கொள்ள குழாய் நிகழ்நேர பிசிஆர் சோதனை கருவியில் (SLAN-96P) வைக்கப்பட்டது.முழு கண்டறிதல் செயல்முறையும் தோராயமாக 140 நிமிடங்கள் எடுக்கும் (ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்புக்கு 20 நிமிடங்கள் மற்றும் பிசிஆர் கண்டறிதலுக்கு 120 நிமிடங்கள்).
526 µl பீட் கரைசல், 1000 µl வாஷ் கரைசல் A, 1000 µl வாஷ் கரைசல் W, 200 µl எலுவேட் மற்றும் 20 µl ப்ரைமர் கரைசல் ஆகியவை முதற்கட்டமாக சேர்க்கப்பட்டு அறைகள் M, W1, W2, E மற்றும் PCR கண்டறிதல் அறைகளில் சேமிக்கப்பட்டன.மேடை சட்டசபை.பின்னர், 150 µl மாதிரியானது அறை M இல் குழாய் மூலம் செலுத்தப்பட்டது மற்றும் துணைப் படம் S9 இல் காட்டப்பட்டுள்ள சோதனைக் கருவியில் FAST-POCT இயங்குதளம் செருகப்பட்டது.சுமார் 82 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, சோதனை முடிவுகள் கிடைத்தன.
வேறுவிதமாகக் குறிப்பிடப்படாவிட்டால், அனைத்து சோதனை முடிவுகளும் FAST-POCT இயங்குதளம் மற்றும் உயிரியல் ரீதியாக சுயாதீன மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி குறைந்தபட்சம் ஆறு பிரதிகளுக்குப் பிறகு சராசரி ± SD ஆக வழங்கப்படுகின்றன.பகுப்பாய்விலிருந்து தரவு எதுவும் விலக்கப்படவில்லை.சோதனைகள் சீரற்றவை அல்ல.சோதனையின் போது குழு பணிகளுக்கு ஆராய்ச்சியாளர்கள் கண்மூடித்தனமாக இருக்கவில்லை.
ஆய்வு வடிவமைப்பு பற்றிய கூடுதல் தகவலுக்கு, இந்தக் கட்டுரையுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ள இயற்கை ஆராய்ச்சி அறிக்கையின் சுருக்கத்தைப் பார்க்கவும்.
இந்த ஆய்வின் முடிவுகளை ஆதரிக்கும் தரவு துணைத் தகவல்களில் கிடைக்கிறது.இந்த கட்டுரை அசல் தரவை வழங்குகிறது.
பணக்கார நாடுகளில் சாக்லா, இசட். & மதுகர், பி. கோவிட்-19 பூஸ்டர்கள் அனைவருக்கும் தடுப்பூசிகளை தாமதப்படுத்தும்.பணக்கார நாடுகளில் சாக்லா, இசட். & மதுகர், பி. கோவிட்-19 பூஸ்டர்கள் அனைவருக்கும் தடுப்பூசிகளை தாமதப்படுத்தும்.பணக்கார நாடுகளில் உள்ள சாக்லா, இசட் மற்றும் மதுகர், பி. கோவிட்-19 பூஸ்டர்கள் அனைவருக்கும் தடுப்பூசிகளை தாமதப்படுத்தும்.பணக்கார நாடுகளில் சாக்லா, இசட் மற்றும் மதுகர், பி. கோவிட்-19 மறுசீரமைப்பு அனைவருக்கும் தடுப்பூசி போடுவதை தாமதப்படுத்தும்.தேசிய மருத்துவம்.27, 1659–1665 (2021).
ஃபாஸ்ட், எல். மற்றும் பலர்.குறைந்த மற்றும் நடுத்தர வருமான நாடுகளில் SARS-CoV-2 சோதனை: தனியார் சுகாதாரத் துறையில் கிடைக்கும் மற்றும் மலிவு.நுண்ணுயிர் தொற்று.22, 511–514 (2020).
வேர்ல்ட் ஹெல்த் ஆர்கனைசேஷன்.தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட குணப்படுத்தக்கூடிய பாலியல் பரவும் நோய்த்தொற்றுகளின் உலகளாவிய பரவல் மற்றும் நிகழ்வு: ஒரு ஆய்வு மற்றும் மதிப்பீடுகள்.ஜெனீவா: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
ஃபென்டன், EM மற்றும் பலர்.பல 2டி மோல்டட் பக்க ஓட்ட சோதனை கீற்றுகள்.ASS பயன்பாடு.அல்மா மேட்டர்.இண்டர் மிலன்.1, 124–129 (2009).
ஷில்லிங், கேஎம் மற்றும் பலர்.முழுமையாக மூடப்பட்ட மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் காகித அடிப்படையிலான பகுப்பாய்வு சாதனம்.ஆசனவாய்.இரசாயனம்.84, 1579–1585 (2012).
Lapenter, N. மற்றும் பலர்.போட்டித் தாள் அடிப்படையிலான இம்யூனோக்ரோமடோகிராபி, என்சைம்-மாற்றியமைக்கப்பட்ட மின்முனைகளுடன் இணைந்து, வயர்லெஸ் கண்காணிப்பு மற்றும் சிறுநீர் கோட்டினின் மின்வேதியியல் தீர்மானத்தை அனுமதிக்கிறது.சென்சார்கள் 21, 1659 (2021).
Zhu, X. மற்றும் பலர்.குளுக்கோமீட்டரைப் பயன்படுத்தி பல்துறை நானோசைம்-ஒருங்கிணைந்த பக்கவாட்டு திரவ தளம் மூலம் நோய் உயிரியல் குறிப்பான்களை அளவிடுதல்.உயிரியல் சென்சார்.பயோ எலக்ட்ரானிக்ஸ்.126, 690–696 (2019).
பூ, எஸ். மற்றும் பலர்.கான்கனாவலின் A-human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 ஹைப்ரிட் நானோஃப்ளவர்ஸ், காந்தப் பிரிப்பு மற்றும் ஸ்மார்ட் போன் வாசிப்பு ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி நோய்க்கிருமி பாக்டீரியாவைக் கண்டறிவதற்கான கர்ப்ப பரிசோதனை துண்டு.மைக்ரோகம்ப்யூட்டர்.இதழ்.185, 464 (2018).